IVD产品经理系列-免疫知识细说之EB病毒

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EB病毒

小桔灯提供了知识文库的服务，接下来小编就给大家带来精彩的单元式分类精彩内容回顾，今天小编分享的是第9部分9.免疫相关检测--EB病毒。

EB病毒

节选《EB病毒检测技术及临床应用》

疾控中心CDC

Epstein-Barr病毒（EBV）

疱疹病毒科，γ亚科，嗜淋巴细胞病毒属，1964年由Epstein、Barr等人首次在非洲儿童的恶性淋巴瘤组织培养中发现。

EBV是是传染性单核细胞增多症的病原体，也是一种重要的肿瘤相关病毒，与鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌、移植后淋巴增殖症等多种肿瘤的发生密切相关，被列为致癌性病毒之一。

传播途径：EBV感染主要通过唾液接触传播，也可通过血液传播；人感染EBV后建立终身潜伏感染，人群感染率超过90%。

1-6岁儿童、14-20岁青少年及年轻成年人高度易感，发展中国家EBV感染多发生在儿童早期。

EB病毒致病机制

原发EBV感染时，EBV先是在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染附近的B淋巴细胞，受到感染的B淋巴细胞进入血液循环可以造成全身性感染。

EBV原发感染后，大多数无临床症状，尤其是6岁以下幼儿大多表现为隐性或轻型发病，但在儿童期、青春期和青年期 ，约50%的原发性感染均表现为IM。

EBV在人体B细胞建立潜伏感染，EBV只表达潜伏抗原（包括EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、EBNA-LP、LMP-1、LMP-2及EBER），受感染者将成为终身带毒者。

在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的EBV可以被再激活，引起病毒复制及临床疾病。

一.EBV常见相关疾病

传染性单核细胞增多症(IM)

特指由EBV感染引起的发热、咽炎和淋巴结肿大的综合征。

1889年被首次描述为“glandular fever”。

1920年正式定义为IM。

1932年发现嗜异性凝集实验。

1968年实验室工作人员感染EBV，出现IM临床症状和嗜异性凝集抗体，明确EBV是IM的病原。

临床表现

25-30%的青少年和<30岁的成年人原发感染EBV后表现IM。儿童时期EBV感染多为亚临床型或不典型症状。

临床症状：发热、淋巴结肿大、扁桃体炎（灰白色渗出）、咽炎、肝脾肿大、眼睑水肿和皮疹、上腭粘膜出血点。

皮疹经常发生于使用氨苄西林、阿莫西林和一些β内酰胺类抗生素1周后，发生率90%。并发症：粒细胞减少、血小板减少、脾破裂、扁桃体肥大致气道阻塞、暴发性肝炎、溶血性贫血、再生障碍性贫血、中枢神经系统疾病。

慢性活动性EBV感染, CAEBV

1975年Horwitz首次描述一些持续性IM患者血清存在高滴度的抗EBV-VCA和EA抗体。

1982年Tobi进一步描述并证实该病。

1984年被称为慢性单核细胞增多样综合征。

1986年被定义为慢性症状性EBV感染。

1991年被称为慢性活动性EBV感染

发生于儿童或年轻成年人。

临床表现：

该病表现为慢性或反复的单核细胞增多样症：发热、肝脾肿大、持续性肝炎、广泛性淋巴结肿大。EBV感染的NK和T细胞克隆扩增在CAEBV具有重要意义。

通常是一种肿瘤前状态或者与严重免疫缺陷有关，可进一步引起EBV相关的T/NK细胞增殖性疾病。预后差，病死率高。

EBV相关的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症

是一种与EBV感染有关的淋巴增殖伴随吞噬血细胞现象的一类疾病。

EBV感染所致CD8+T细胞的异常增殖及其激活巨噬细胞，导至炎症细胞因子大量释放产生高细胞因子血症（细胞因子风暴）是EBV-HLH的主要病例生理特征。

临床表现发热、肝脾肿大、黄疸、全血细胞减少、DIC，骨髓和其他组织见嗜血细胞、LDH、铁蛋白、β微球蛋白。

EBV-HLH常见于儿童和青少年。

二．EBV感染的实验室诊断

嗜异凝集抗体试验

嗜异凝集抗体试验：也称“Monospot”试验。在EBV还未确定为IM的病因之前，1932年引入临床实践诊断IM。

当时发现IM患者的血清或血浆可以凝集马或绵羊的红细胞。该抗体在病程第1～2周出现，持续约6个月。

在青少年原发性EBV感染中其阳性率可达80％-90％，约10％的青少年缺乏对嗜异性抗体的阳性反应。

化学发光技术

胶体金

EBERS原位杂交试验

EBV潜伏感染的细胞含有大量的EBERl／EBER2（EBERS）转录子，其主要功能是抑制干扰素介导的抗病毒效应和凋亡。该转录子不翻译成蛋白质，每个EBV潜伏感染的细胞含有大约106拷贝EBERS，被认为EBV潜伏感染的最好标志物，因此原位杂交检测肿瘤细胞中EBERS是诊断肿瘤是否EBV相关的金标准。

EBV病毒核酸检测

实时荧光定量PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法。鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关疾病患者高水平活动性感染。EBV载量检测有多种方法，Real-time PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法，有较强的敏感性和特异性。不同的EBV疾病进行Real-time PCR检测时，需要的标本不同。

传单的EBV感染实验室诊断：

血清学检测：

同时满足下列2条者可以诊断为EBV-IM:

1.下列临床症状中的3项：发热、咽峡炎、颈淋巴结肿大、肝肿大、脾肿大；

2.原发性EBV感染的血清学证据，满足下列2条中任一项：

（1）抗EBV-CA-IgM和抗EBV-CA-IgG阳性，且抗EBV-NA-IgG阴性。

（2）抗EBV-CA-IgM阴性，但抗EBV-CA-IgG阳性，且为低亲和力抗体。

DNA检测:

IM患者外周血中EB病毒载体在2周内达到峰值，随后很快下降。

至病程14天，多数EBV-IM患者血清中已检测不到病毒核酸，病程22天后，所有EBV-IM患者血清中均检测不到病毒核酸。IM患者不推荐进行EB病毒载量检测。

慢性活动性EBV感染的实验室诊断：

DNA检测

绝大多数CAEBV患者PBMC中EBV-DNA水平高于102.5拷贝/ug DNA、部分CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA阴性。CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA水平与病情严重程度和预后有关。

三．支持指南

《儿童EB病毒相关疾病的诊断标准和治疗原则》

《器官移植受者EB病毒感染和移植后淋巴增殖性疾病临床诊疗专家共识》

《儿童主要非肿瘤性EB病毒感染相关疾病的诊断和治疗原则建议》

《儿童肺炎支原体肺炎诊治专家共识(2015年版)》

随着免疫组文章的结束，小编将带来流式细胞法的热门应用。