根据孔数、形状、处理方式、颜色选择细胞培养板的方法

生物科研实验室

细胞培养作为生命科学研究的基础技术，早已成为现代生物医学研究的关键手段。在细胞培养实验里，细胞培养板是常用且重要的实验室耗材，选对合适的细胞培养板，对细胞生长和实验结果的准确性起着决定性作用。

细胞培养板的分类方式多样。按底部形状划分，有平底、圆底（U型）和V底（V型）；从培养孔的孔数来看，涵盖6、12、24、48、96、384、1536孔等规格；表面处理方式主要有TC处理和超低吸附处理；颜色则包含透明色、白色、黑色等。那么，面对如此繁多的规格，究竟该如何挑选适配实验的细胞培养板呢？

1. 孔数的选择

细胞培养板的孔数常见的有6孔、12孔、24孔、48孔、96孔和384孔。不同孔数的培养板，所能容纳培养的细胞数量不一样（详见表1），适用的实验场景也各有差别。孔数的选择，主要得依据实验所需的通量水平和具体实验要求来定。比如说，蛋白质免疫印迹（WB）、流式细胞检测这类实验，需要较多的细胞样本，而且最终检测通量较低，一般会选用6孔板、24孔板；而像细胞增殖及毒性检测（CTG）、细胞活性检测（CCK8）、噻唑蓝比色（MTT）这类实验，通量较高，检测手段也能实现自动化操作，大多会选择96孔板或者384孔板。
2. 底部形状的选择

细胞培养板按底部形状主要分为平底、圆底（U型）和V底（V型）三种。平底培养板适用于各类细胞培养，是日常细胞培养实验中最常用的。而圆底（U型）和V底（V型）培养板，通常是为满足特殊实验需求而使用，日常实验中相对少见。圆底（U型）培养板常用于悬浮细胞培养，比如在免疫学实验里，需要将两种不同淋巴细胞混合培养，让它们相互接触以激发反应时，圆底（U型）板能借助重力把细胞聚集在较小范围内。V底（V型）板会使细胞紧密接触，一般用于细胞杀伤实验，能让有效靶细胞紧密贴合（圆底（U型）板也可替代，加入细胞后低速离心即可） 。

3. 表面处理方式的选择

细胞培养板的表面处理主要有TC处理和超低吸附处理。具体选哪种处理方式，关键要看培养的是贴壁细胞还是悬浮细胞。细胞培养板大多以聚苯乙烯为原材料，这种材料具有疏水性。贴壁细胞必须附着在亲水表面才能生长，经过TC处理的细胞培养板，通过表面改性，更适合贴壁细胞生长。超低吸附处理是在培养板表层镀上特殊的两性分子聚合物膜，能有效阻止细胞附着，满足悬浮细胞的培养需求。所以，培养贴壁细胞可选择TC处理的细胞培养板，培养悬浮细胞则可选择超低吸附处理的细胞培养板，或者未经处理的细胞培养板。

4. 细胞培养板颜色的选择

细胞培养板的颜色与实验应用紧密相关。其颜色主要有透明、白色、黑色。要是用相差显微镜观察细胞，或者直接肉眼观察，选择透明的细胞培养板即可。但对于可见光光谱以外的实验，比如冷光或荧光实验，就必须使用有颜色的细胞培养板（白色或黑色）。

使用从顶部读数的仪器时，培养板底部得是不透明的；而使用显微镜观察，或者用从底部读数的仪器时，就得选底部透明的培养板。冷光样品一般选白色表面的培养板，这样能最大程度提高信号反射率；荧光应用（波长大于300nm）通常使用黑色表面的培养板，以吸收激发信号。而且有颜色的表面还能避免相邻孔之间的信号干扰。不同颜色培养板的具体应用如下：
1）发光检测（冷光）——选白色细胞培养板，提高信号反射率；
2）荧光检测（荧光）——选黑色细胞培养板，吸收激发信号，防止信号串扰；
3）顶部读数——用底部不透明的细胞培养板；
4）显微镜观察或底部读数——用底部透明的细胞培养板。

5. 细胞培养板与酶标板的使用辨别

酶标板作为固相载体，在吸附抗原、抗体或抗原抗体复合物方面作用显著，广泛应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析（A260/A280）、蛋白定量（A280/BCA/Braford/Lowry）、酶活及酶动力学检测、酶联免疫测定（ELISAs）、细胞增殖与毒性分析、细胞凋亡检测（MTT）、报告基因检测及G蛋白偶联受体分析（GPCR）等实验。和细胞培养板相比，酶标板对降低实验误差的要求更高，制作工艺标准严格，价格也相对较贵。96孔细胞培养板和酶标板在功能上有一定重合，它们在使用时有哪些区别呢？

1. 细胞培养板能否当作酶标板使用？
检测可见光波长的吸收值时，多数96孔透明板都能派上用场。但要是检测高精度或特殊波长，为避免孔板自身吸收造成干扰，就得用专门的酶标板。

2. 酶标板可以用来培养细胞吗？
酶标板没做贴壁处理，不能用来培养贴壁细胞。

3. 细胞培养板能测吸光度吗？
可以，细胞培养板常用来检测样品蛋白定量等吸光度相关实验 。