关于wb条带宽窄不一如何解决？

生物科研实验室

✅为什么要补齐❓
蛋白定量后若内参还是不齐，就需要通过调整上样量来使内参一致，上样量相差太大，不补齐的话可能就会出现P1的问题：条带宽窄不一（是可能出现，不是一定会出现！）

P1上图上样量相差10ul（依次是15,5,5），没有补齐时，上样量多的最左侧的孔条带就很宽，右侧两个孔条带就比较窄，这种数据是不能用的，而补齐后条带基本就一致了…

✅什么时候应该补齐❓
样品上样相差太多时，相差大于3ul就建议补齐了。

✅用什么补齐❓怎么补齐❓
用制作蛋白样品的那个溶液，也就是loading buffer补齐，样品是几*的loading，就用几*的loading去补。

➡️怎么补齐？❓
举例：若3个孔上样量为10、5、7
第一个孔不变
第二个孔蛋白样品5ul➕空loading buffer 5ul混匀后上样
第三个孔蛋白样品7ul➕空loading buffer 3ul混匀后上样。

这样，就保证点样的蛋白样品质量一致，且体积也一致了～
🌟（注意用和蛋白样品一样浓度的loading，浓度相差别太大，不然还是会挤压的）