一文带你掌握细胞增殖七大检测技巧

生物科研实验室

在科研实验中，伙伴们时常需评估细胞增殖的状态，譬如探究某个基因对细胞生长的调控作用，或是验证抗癌药物的有效性。小伙伴们，别再向师兄师姐求救了，这里为你汇总了细胞增殖检测的全方位攻略！
一、Brdu/EdU 标记技术
5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu），作为胸腺嘧啶的“替身演员”，在DNA合成的“戏剧”中替代主角出场。为了吸引目光，它还披上了特异性抗体的“华丽外衣”，在免疫荧光或流式细胞术的“闪光灯”下显露真身，揭示其参与DNA合成的“戏份”。
EdU（5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷）则是另一位“替身B”，同样能在细胞增殖时“潜入”DNA复制现场，与Apollo荧光染料联手，迅速揭示细胞DNA的复制活跃度。这项技术广泛适用于细胞增殖、分化、生长发育、DNA修复、病毒复制及细胞追踪等领域，是药物筛选实验的得力助手。
二、MTT/CCK-8 测定法
噻唑蓝（MTT），昵称“蓝小姐”，在细胞活力检测中扮演着关键角色。她牺牲自我，与线粒体内的脱氢酶“共舞”，若脱氢酶活跃，则“蓝小姐”变身兰紫色甲瓒，沉积于活细胞内。随后，二甲基亚砜（DMSO）溶解甲瓒，通过酶标仪在490nm波长下的读数，即可间接反映活细胞的数量。
CCK-8作为MTT的升级版，内含WST-8成分，与MTT相似却更胜一筹。在电子耦合剂的助力下，它同样能揭示脱氢酶的活性，生成橙黄色甲瓒，颜色深浅与细胞增殖情况成正比，450nm波长下测定光吸收值，即可轻松评估细胞活力。
三、CFSE 荧光标记法
羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE），一种穿透细胞膜的荧光染料，与细胞内的氨基结合后，成为细胞蛋白质的“标签”。细胞分裂时，CFSE荧光均匀分配给子细胞，荧光强度逐级递减。利用流式细胞仪的488nm激发光，即可追踪细胞增殖的轨迹。
四、Ki67 核抗原染色技术
Ki67染色，瞄准了细胞周期中除G0期外的所有活跃增殖细胞。它如同一个“增值探测器”，帮助科研人员评估药物或化合物的促增殖或抗增殖效果。无论是免疫组化还是流式细胞术，都能轻松捕捉到这些增殖细胞的身影。
五、3H-TdR 掺入技术
3H标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），作为DNA合成的“**”，能嵌入新合成的DNA链中。通过液体闪烁计数器的检测，每条带有3H标记的DNA链都如同被点亮，揭示了细胞DNA的代谢状态和增殖情况。这项技术敏感度高、客观性强，但设备成本和放射性污染问题也不容忽视。
六、微型活细胞观测系统
传统细胞实验方法往往只能捕捉特定时间点的细胞状态，而微型活细胞观测系统则打破了这一局限。它小巧便携，可置于培养箱内，对活细胞进行长时间、连续的动态监测。通过高清物镜和AI智能分析，实时记录细胞生长、分裂的全过程，生成细胞生长曲线，为细胞研究提供了全新的视角。
七、实时无标记细胞分析技术（RTCA）
RTCA技术，是安捷伦推出的活细胞分析利器。它巧妙地将微电极阵列嵌入细胞培养板底部，构建了一个实时、动态的细胞阻抗检测系统。当细胞在电极表面生长、形态变化时，会改变电极界面的阻抗，这种变化与细胞的生理功能紧密相关。通过实时监测电极阻抗，即可获取细胞生长、伸展、形态变化等全面信息，为细胞研究开辟了新途径。