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qPCR中生物学重复与技术重复是什么?
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qPCR中生物学重复与技术重复是什么?
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发表于 2025-7-24 11:34
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我们都知道在做qPCR实验的时候,为了避免误差一般会设置重复组,但这个重复是什么重复呢?应该怎么做才能减少实验误差?怎么做才能确保我们的数据有意义?今天我们就来深入了解一下重复背后的逻辑!
在生物学实验中,设置重复组的主要目的包括以下三点:
1、减少实验误差,提高数据可靠性
2、排除偶然因素的干扰
3、为统计分析提供基础
在qPCR实验中,我们都知道会有生物学重复和技术重复两种,那分别是什么意思呢?
首先技术重复:指同一个样本进行多次检测,一般我们设计每个样本做三个重复孔,即三个技术重复。
比如同个样本提取的RNA,逆转录成cDNA,分到3个管进行qPCR实验。技术重复是为了排除实验操作与测量带来的误差影响!
生物学重复:对不同个体或群体的样本(如小鼠1、2、3)采用相同实验处理。
例如,在研究药物效果时,使用5只不同小鼠作为样本,使用相同的处理方式,这里的每只小鼠即为一个生物学重复。这是生物试验设计中真正的比较层面。即单独某一个生物学个体的情况无法代表总体情况,需要我们的数据有可重复性。
所以在qPCR实验中要有生物学重复,也要有技术重复,进而来提高实验的可靠性!
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