解读PCR检验实验室检查要点指南

fredamd

笔者结合以往工作经验，简要阐述几点对该指南的看法。

1、建立PCR实验室的关键在于如何避免各种污染。在PCR实验室中开展PCR检测的常见污染情况，包括：试剂受污染、标本间污染、空气环境中天然基因组DNA的污染以及扩增产物的污染。一旦PCR实验室发生污染，后续实验工作必须停止，直至找到污染源并完全排除为止。但查找并排除污染源，是非常耗时耗力，工作十分繁琐，还影响正常工作开展。因此采取严格周全的预防措施，以尽可能降低日常开展PCR检测工作遇到不必要的麻烦。

如何做好这方面预防工作？一方面，在硬件要求上，首先应合理、严格划分各个独立的工作区域并有明显的各区标识；其次必须设计安装合理的风控系统，确保各实验区不同气压要求和气流通向控制；再者各实验区应配有完善且独立的实验仪器设备和物品工具，从而保证各区实验工作正常进行。另一方面，在软件配套上，首先应建立各实验区的使用管理制度，如人员通道流向、各区设施物品区分标识、物品存放区域标识、各区实验服区分标识等；其次应建立规范的操作要求，如对从事PCR检测工作人员先进行相应技能培训，合格者方可上岗，另在PCR实验室中开展工作必须采用实验服、一次性的手套、脚套和帽子等防护措施，最后对实验中产生的废弃物采取严格规范的销毁处理措施。

2、《要点指南》中提到PCR试剂特殊性：pcr试剂在生产的过程中非常容易受到污染，因此对其生产厂房的要求也极高，《医疗器械生产质量管理规范附录 体外诊断试剂》中明确地说明聚合酶链反应（PCR）试剂配制及分装等产品的配液、包被、分装、点膜、干燥、切割、贴膜以及内包装等，生产区域应当不低于100,000级洁净度级别。

3、“应当避免气溶胶所致的污染，尽量减少在扩增区内的走动，扩增反应管不得在扩增区打开。”笔者认为，将PCR实验室分成各个独立的实验区，整个区域有一个整体的缓冲走廊，每个独立实验区还应设置缓冲区，同时各区设置合理的压差并安装压差监测装置，使整个PCR实验过程中试剂和标本避免受到气溶胶的污染，同时也降低扩增产物对人和环境的污染。同时，不仅在扩增区内，还有标本制备区内也同样应避免不必要的走动，因为在加样操作过程中可能会发生气溶胶所致的污染。

来源：弗锐达医疗器械资讯