核酸纯化用硅胶膜销售，核酸纯化柱

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出售：核酸纯化柱，硅胶膜IVD分子诊断核酸提取用原材料。
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实验室测试资料：

核酸纯化柱的选择专题2：核酸纯化柱不同层（膜厚度）洗脱效率的比较；交流咨询QQ:1492876083         

本测试方法：         

通过质粒提取试剂盒测试不同厚度的硅胶膜，用50，100，150微升洗脱测定洗脱效率         

实验室设计         

1：选择实际层数为2,3,4,5,6,7,8,9,10层（1mm厚，相当于市场厚度的一倍，市场大多是0.5mm厚膜，可自行拆解观察厚度，不同公司厚度不一样）         

2：先用50微升体积洗脱测定一次浓度；然后将样品补充50微升洗脱缓冲液，将其从新加入核酸纯化柱洗脱测定浓度；第二次补充50微升洗脱缓冲液，将150微升缓冲液加入到核酸纯化柱再次洗脱测定浓度，测试硅胶膜的洗脱效率。         

3：起始浓度的菌液选取3mL测试（不同收集浓度的菌产量有差别，后面我们将进行测试）         

4：选择含PUC19质粒的DH5A菌作为提取对象。         

实验材料：         

含PUC19质粒DH5A菌株，分光光度计 。         

实验方法         

按照艾比根质粒小量提取试剂盒提取过夜培养的菌液，测定浓度。         

实验结果数据分析：         

PUC19质粒提取原始测量浓度数据：         

膜层数	洗脱                                          体积	货号	260/280	260/230	Conc. (Ng/ul)
2层	50ul	P2-50/500/5000	1.98	2.23	333.1
3层	50ul	P3-50/500/5000	2.03	2.25	260.1
4层	50ul	P4-50/500/5000	2.02	2.24	266.7
5层	50ul	P5-50/500/5000	2.01	2.2	251.9
6层	50ul	P6-50/500/5000	2.02	2.26	267.1
7层	50ul	P7-50/500/5000	2.02	2.24	268.5
8层	50ul	P8-50/500/5000	1.98	2.19	290
9层	50ul	P9-50/500/5000	2.0	2.21	272.3
10层	50ul	P10-50/500/5000	1.98	2.18	289.4
2层	100ul	P2-50/500/5000	2.09	2.24	163.5
3层	100ul	P3-50/500/5000	2.07	2.2	155.9
4层	100ul	P4-50/500/5000	2.1	2.23	166.1
5层	100ul	P5-50/500/5000	2.08	2.21	165.8
6层	100ul	P6-50/500/5000	2.1	2.24	161.7
7层	100ul	P7-50/500/5000	2.1	2.24	177.8
8层	100ul	P8-50/500/5000	2.07	2.2	177.3
9层	100ul	P9-50/500/5000	2.08	2.21	176.3
10层	100ul	P10-50/500/5000	2.08	2.22	182.5
2层	150ul	P2-50/500/5000	2.1	2.18	117.4
3层	150ul	P3-50/500/5000	2.11	2.21	111.7
4层	150ul	P4-50/500/5000	2.12	2.24	114.2
5层	150ul	P5-50/500/5000	2.12	2.25	116.3
6层	150ul	P6-50/500/5000	2.14	2.26	112
7层	150ul	P7-50/500/5000	2.12	2.23	123.1
8层	150ul	P8-50/500/5000	2.13	2.27	119.9
9层	150ul	P9-50/500/5000	2.15	2.28	122.9
10层	150ul	P10-50/500/5000	2.11	2.25	130.3

图1 膜厚度和洗脱体积比较         

洗脱体积（图1）	平均浓度（ng/ul））	备注
50ul洗脱	250	3ml菌液测试
100ul洗脱	150	3ml菌液测试
150ul洗脱	100	3ml菌液测试

         

         

洗脱体积	总产量	备注
50ul洗脱	12	3ml菌液测试
100ul洗脱	16	3ml菌液测试
150ul洗脱	18	3ml菌液测试

         

洗脱体积	洗脱效率	备注
50ul洗脱	75%	3ml菌液测试
100ul洗脱	95%	3ml菌液测试
150ul洗脱	相对比较，假设100%	3ml菌液测试

结果分析及建议：         

• 对于需要50ul洗脱体积的建议选择P2-P5厚度的膜，可以满足高浓度要求。                                 
• 对于洗脱体积大于50建议选择p6-10的膜，产量增加。                                                         
• 其它厚度的刻自行研究测试。                                                                                 
• 不同菌液和质粒提取含量有所差别，具体选择生产企业可自行测试。                                                                                                         
• 50ul洗脱效率大致75%，100ul洗脱效率大致95%。建议洗脱体积控制50-100ul左右，可增加洗脱效率。                                                                                                                                 
• 对于不同配方试剂盒提取样品洗脱效率会有所差别，具体可自行测试研究。                                                                                                                                                         
  
  

说明：本次实验仅供参考，只是本实验室实验员操作测试对比数据，不同使用环境请自行研究测试。