空白限vs检出低限

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1.空白限（limitof blank，LoB）:LoB是美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP17-A文件中使用的术语，它是指在规定的可能性条件下，空白样品被观察到的最大检测结果［1］。最理想的情况是我们检测每一份空白样品的结果都应该为0，但是由于随机误差的存在，空白样品检测值会分布在一个较低水平的区间之内。EP17-A规定，空白样品单侧95%分布的上限就是LoB。此时会有5%的空白样品被误认为有分析物的存在，这就是假阳性，我们犯这种错误（Ⅰ类错误或α错误）的概率就是5%。

当某份样品的观察值超过LoB，则表明样品中的分析物浓度超过了0。同理，由于随机误差的存在，低浓度分析物样品的检测值如果低于了LoB，我们就会误认为样品中不存在可检出的分析物，得出假阴性的结果，这就是Ⅱ类错误或β错误。

因此，LoB的存在决定了我们犯错误的几率大小，如何确定低浓度样品和空白检测的界值至关重要。ISO推荐在α=β=5%条件下，确定LoB。若空白值呈正态分布，LoB为单侧95%分布的上限，即LoB=μB+1.645σB，式中μB和σB分别为空白样品检测的均值和标准差。

如果空白值呈非正态分布怎么办？此时实验室必须用非参数方法进行评估。原理：假定空白样品重复测量结果数为NB，将数据由小到大排列，估计第95百分位数所在位置为［NB(95/100)+0.5］的值，即LoB=PctB(100-α)=PctB(95)。

建立LoB：通常需对1个或数个空白样品进行重复检测，共获得60个空白结果（NB=60）估计LoB。

验证LoB：厂商声明了LoB时，实验室应对空白样品进行至少20次重复检测，若没有3个重复测量值超出声明的LoB，则验证通过，可直接使用厂商声明的LoB。但目前绝大多数厂商尚未按EP17-A文件提供LoB，因此，实验室应按照上述方法建立自己实验室的LoB。

2.检出低限（lowerlimit of detection，LLD）:LLD是指样品单次检测可以达到的非空白检测响应量对应的分析物含量［2-4］。也就是说分析物最低要达到多少浓度，才能不被检测为0，不会产生假阴性。以样品响应量与样品内分析物含量呈正比例关系为例，通常的做法是对空白样品进行至少10次重复测量，假定空白样品多次重复测量的检测信号值服从正态分布，以空白样品检测信号±2s（双侧95%分布范围的上限）或±3s（双侧99.7%分布范围的上限）所对应的分析物含量即为LLD。值得注意的是，若直接读出浓度单位的检测系统对低于0的检测将报告为0，其分布不呈正态，此时应使用初始值来计算均值和标准差，然后再转换成浓度单位。

从LoB和LLD的定义讲，二者本质是一样的，细微区别在于：（1）LoB是通过空白样品来描述，LLD是通过低浓度分析物来描述；（2）测量次数和统计方法略有不同；（3）LoB是空白样品重复测定结果单侧95%分布范围的上限，LLD是双侧95%或99.7%分布范围的上限；（4）LoB适用于正态分布和非正态分布，而LLD只适用于正态分布。

参考文献

［1］Clinical and LaboratoryStandards Institute. Protocols for determination of limits of detection andlimits of quantitation［S］；ApprovedGuideline. EP17?A. Wayne, Pennsylvania：CLSI，2004：1-39.

［2］张秀明，庄俊华，郑松柏，等.临床化学发光免疫检验测定AFP的分析性能验证与实验方法［J］.中华检验医学杂志，2007，30:760-765.

［3］温冬梅，张秀明，王伟佳，等.化学发光免疫法测定AFP的空白限、检出限和定量检测限的建立与评价［J］. 临床检验杂志，2010，28:469-471.

［4］张秀明，温冬梅，王伟佳，等. 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能评价［J］.中华检验医学杂志， 2011，34：1152-1157.

来源：中华检验医学杂志  作者：张秀明等

huangchj03

好好学一学

macro20

讲的蛮好，定义及区别很清楚；但是涉及到统计学的知识就是有点懵逼了！看来要学学统计学了