常见的尿细菌学检查方法及临床意义

检验医师

尿细菌学检查对诊断尿路感染具有重要价值。主要有以下二种方法：

(1)尿涂片找细菌：尿路细菌感染时尿中含有大量细菌 ，尿液涂片镜检易找到细菌。涂片方法是：将清晨第一次新鲜中段尿10mL，取3000rpm离心后之沉渣做涂片，火焰固定，进行革兰氏染色，必要时行抗酸染色。每高倍视野细菌数少于10个或未找到，提示中段尿培养阴性或菌落数低于10^3/mL。如果细菌数为15～30个/高倍视野，中段尿培养菌落数常大于10^5/mL。据中山医科大学叶任高教授经验，其可靠率为90%以上。并认为，即使已开始使用抗生素的病例，尿培养阴性，尿沉渣革兰氏染色找细菌仍有可能找到，这样就可弥补在应用抗生素的情况下尿细菌培养阴性的缺点。另外，应用革兰氏染色涂片找细菌可以初步确定尿路感染是阳性球菌或阴性杆菌，作为使用抗菌药物的参考。总之，尿液涂片镜检，操作方便，设备简单，适用于基层医疗单位，也可作为大规模筛选病人之用。

(2)尿液细菌培养：正常人尿内有一定数量的细菌，尿道口周围亦有大量细菌。正常人尿道口及阴道存在以下细菌：表皮葡萄球菌、链球菌、枯草杆菌、假白喉棒状杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、卡他布兰汉氏菌及耻垢分枝杆菌等。外阴冲洗不净，细菌常混入尿中，但细菌数小于10^3/毫升。尿细菌培养的目的主要是运用中段尿培养菌落计数的方法以鉴别是否为尿路感染。

尿细菌培养检查在临床上常用的是定量接种环法，即沾取0.001毫升的新鲜中段尿，均匀涂划在血液琼脂平板上(平板直径＜9毫米)，在37℃条件下，经24小时孵育后，整个平板上所见的菌落数乘以1000，即得每毫升菌落数。若尿菌落数大于105/毫升为感染，准确率约80%；细菌数小于103/毫升或有多种细菌生长，为污染所致，无临床意义。但值得注意的是球菌，特别是粪球菌及肠球菌繁殖缓慢，其尿菌落数若为10^3～10^4/毫升之间，即有诊断价值；细菌数在10^3～10^5/毫升者不能排除感染，考虑是否因应用抗生素、清洗消毒剂混入、尿过频、细菌生长缓慢等因素所致，必要时复查。

不论中段尿，还是导尿，都不可避免前尿道细菌的污染。因此，做细菌培养而不加含菌量计数，结果很不可靠。但在常规消毒下做膀胱穿刺取尿作定性却很可靠，只要培养出细菌，不论细菌数多少，均认为是感染，不会出现假阳性。尿细菌定量培养结果很可靠，但遇到下列情况时需做膀胱穿刺尿培养：①没有条件做尿含菌量计数的单位，在诊断上有困难时；②高度怀疑有尿路感染而尿含菌量却低；③反复尿定量细菌培养结果均可疑者；④要进一步确定是否有混合感染存在；⑤可疑的厌氧菌所致者。以上情况均考虑做膀胱穿刺尿培养。方法如下：鼓励病人饮水，使膀胱充盈至耻骨联合以上，扪及膀胱后即可穿刺。先剃毛、消毒，用9号250px长的针头连接注射器，在耻骨联合上方正中线穿入皮肤，然后猛力穿入膀胱，将尿液收集于无菌试管送检。拔针后用无菌纱布覆盖。本法是避免污染的最好方法。缺点是病人有一定的痛苦。

尿培养的常见菌可分为3组：①致病菌，如大肠杆菌、副大肠杆菌、克雷勃菌属等急性感染菌，变形杆菌、假单孢菌属、结核杆菌等慢性感染菌，链球菌、葡萄球菌等潜在致病菌。② 少见的、不肯定的致病菌，如沙门菌属等。③污染菌，如白色葡萄球菌类等。

急性泌尿系感染多为单种细菌，大肠杆菌占60%～80%，余为金黄色葡萄球菌、变形杆菌、粪肠球菌；慢性感染常混合其它细菌；绿脓杆菌多在手术或插管后引起感染。

影响尿培养结果的因素有哪些?

尿培养出现假阳性或假阴性结果，一般占1/3～2/3。影响尿培养结果的因素归纳有如下8种：

(1)中段尿收集不合标准，外阴消毒对尿培养影响很大，消毒液过多而混入尿标本，抑制了细菌生长，出现假阴性结果。

(2)尿液收集要新鲜，放置时间不宜超过1小时，否则细菌大增，出现假阳性。

(3)尿培养前曾使用抗菌药物，可出现假阴性。

(4)膀胱内尿液停留时间短(不到6小时)，或饮水太多，稀释了尿中细菌，影响了结果的正确性。

(5)血源性急性肾盂肾炎、肾实质内小脓肿形成，慢性肾盂肾炎粘膜病变趋向痊愈，而肾实质病变依然存在；或尿路梗阻并存感染灶和尿路不相通，则尿中细菌往往呈阴性。

(6)菌种不同，对菌落计数有影响。

(7)接种技术上的错误，也可影响结果。

(8)尿路感染的排菌可呈间歇性，如慢性肾盂肾炎没有急性症状时，尿培养可为阴性，但在其急性发作时，尿培养则常为阳性。

由此可知，对尿细菌学检查结果的判断，必须结合临床表现，有时还要反复多次进行。

如何看待尿细菌培养的假阳性和假阴性?

一般来说，诊断尿路感染必须以细菌定量培养阳性为依据。如果反复定量培养都是阴性，则可认为无活动性尿路感染的存在。但对尿细菌培养的结果，也应结合临床表现来判断。尿细菌培养的假阳性和假阴性的现象在临床上并不少见。

由于各种各样的原因，如中段尿标本收集不合无菌操作标准，或超过1小时才接种，或接种技术错误等，细菌定量培养可能出现假阳性的结果。有人认为，对无症状菌尿者，1次中段尿定量细菌培养结果阳性，其准确率只有85%，2次阳性且为同一菌种，则其准确率可达95% 。

此外，部分尿路感染患者，其尿细菌定量培养可能为假阴性。其原因主要有以下几点：①患者在最近2周内使用过抗菌药物。②尿在膀胱内停留时间短，不足6小时，细菌没有足够的时间繁殖。这在有尿频、尿急症状的患者中较为明显。③饮水太多，稀释了菌尿。④细菌感染病灶与尿路不通。如在血行性肾盂肾炎的早期或尿路梗阻时，病人有明显尿路感染症状，但尿细菌培养阴性。⑤尿路感染的排菌可呈间隙性，如慢性肾盂肾炎没有急性症状时，有些病人的尿细菌培养可为阴性，但在急性发作时，尿细菌培养则常为阳性。⑥L型变态细菌只能在高渗培养基内生长，一般培养基不能培养出来。有人估计，肾盂肾炎患者尿细菌培养阴性者，大约20%与L型变态细菌有关。

综上所述，对尿细菌培养结果应结合临床表现予以判断，有时还需反复多次进行培养。

尿细菌培养阳性时，如何区别是尿路感染还是标本污染引起?

尿培养尤其是中段尿培养阳性时，有两种可能性：一是泌尿道本身感染所致，二是由尿标本污染引起。怎样才能确定是由哪种原因引起的呢?比较可靠的方法是做细菌定量培养。一般报告，中段尿定量培养每毫升尿中的细菌数在10万个以上时，可诊断为真性细菌尿；1万到10 万之间为可疑，如同时并有明显症状时，仍有诊断价值，应复查；在1万个以下则感染的可能性很小；在1千个以下则多为污染。对繁殖力低的细菌，如肠球菌、粪链球菌等，如每毫升尿中细菌数超过1万者也有诊断意义。但需注意下列情况可使细菌定量培养呈假阴性：

①在抗菌药物治疗期间或停药后不久；

②尿液在膀胱停留的时间过短，或因输尿管引流受阻，以致肾盂尿进入膀胱的量过少；

③尿液因补液、利尿而稀释；

④尿pH值过低或过高；

⑤部分肾盂肾炎患者呈间歇性排菌排脓，宜多次检验才能证实为真阴性。

以上可见，对细菌定量培养结果，应密切结合病人具体情况进行全面的分析，才能作出正确的诊断。

尿液细菌学检查包括哪些内容，其临床意义是什么?

尿液细菌学检查对尿路感染的诊断与治疗有决定意义。常用的方法有：①尿沉渣涂片找细菌：可以初步确定尿路感染是阳性球菌还是阴性杆菌感染，作为使用抗菌药物的参考。清晨第1次新鲜中段尿沉渣涂片，每高倍镜视野下细菌数＜10个或无细菌，则通常中段尿培养阴性或菌落计数＜10^3/mL；细菌数达15～20个则中段尿培养菌落数＞10^5/mL。②尿液细菌培养：目前应用中段尿培养菌落计数的方法可以鉴别是否系尿路感染。＜10^4/mL认为无意义或污染，菌落数＞10^5/mL可作为尿路感染诊断的根据，当菌落数10^4～10^5/mL为可疑。尿培养的常见微生物有致病菌、少见的不肯定的致病菌和污染菌三大类。③结核菌检查：为确定有无泌尿系结核的重要方法。尿液浓缩涂片抗酸染色找结核菌，10^4～10^5/mL为阳性，但阳性率低。

作者：佚名 来源：检验世界网