Juno Therapeutics：关于癌症细胞治疗TCR-T及CAR-T的技术简介

长长的路

T Cell Receptors （TCRs）

TCR示意图，来源Juno官网

高亲和性的TCR-T技术既能识别癌细胞膜表面蛋白，也能够识别癌细胞内蛋白；因而TCR-T可以靶向更广泛的肿瘤类型。

向T细胞中导入的基因序列所编码的蛋白，用来组装识别特异性MHC/肽段结构的TCR。TCR不但具备能够识别来自胞内蛋白的肽段的能力，而且完全是人源化的，因此TCR-T技术产生的免疫排异的可能性很小。

一种特定的TCR局限于一种特定类型的MHC。由于人类群体MHC类型的可变性，不同TCRs将用于不同的群体。我们的TCR载体是从健康的捐献者中筛选得到可以天然产生的高亲和性的TCRs，它可以识别特定的的MHC/肽段组合。对于选择的具有结合亲和力的TCR载体，既可以直接使用，也可对其结合区口袋结构中的高度可变区进行突变后使用，以得到一个新的高亲和力的载体。

从目前接受过TCR治疗的患者疗效看来，这些TCR细胞在输入回患者体内后的表现接近于内源性T细胞。在识别它们特定的癌症相关蛋白时，它们经历了类似内源性T细胞的增殖阶段，以及细胞毒性激活过程。

CAR technology

CAR-T示意图，来源Juno官网

靶向原件：

我们典型的CAR载体通常使用一个单链可变片段，即scFv，来识别特定的靶标蛋白质。scFv来源于可以特异性识别靶向蛋白抗体的一部分，当它表达在CAR-T细胞的表面、并随后结合到癌细胞的某个靶向蛋白时，它能够维持CAR-T细胞接近癌细胞，并激活CAR-T细胞。比如，我们在临床上应用的一种先进的CAR-T细胞项目中，即使用scFv靶向细胞表面蛋白CD19。

间隔和跨膜区：

间隔区是连接胞外scFv靶向元件与跨膜区的部分。ScientificFounders的研究数据表明，间隔区（spacer）可能需要被优化，从而可以更好地发挥CAR-T细胞接近癌细胞的效果。因为这一效果受到一些因素的影响，比如靶向蛋白的大小，靶向蛋白与scFv的结合位点，以及scFv的大小与亲和力等。

共激活区域：

CART细胞的scFv段识别结合癌细胞时，会发生构象的变化。通过一个胞内信号蛋白结构域CD3-zeta向细胞发送激活信号。同样，我们目前的CAR载体包含一个CD28或4-1BB的共激活信号区用来模仿作为“第二信号”，来增加CAR-T细胞的激活作用，从而使T细胞能够增殖并杀死癌细胞。

第二代CAR技术

Juno投入了巨大的资源对CAR载体每一个原件是怎样影响T细胞效力和持久性的，进行深入研究。从长期创造新型CAR-T细胞产品、增加患者利益的角度来看，我们相信这些将是十分关键的决定因素。

基于我们特有的技术以及对癌细胞免疫逃避机制的理解，我们发展的两款新一代CAR-T技术可以增强T细胞在癌细胞或肿瘤微环境中的激活信号强度。

在我们D的双特异性（bispecific）CAR-T技术中，CAR-T细胞含有第二个结合位点（secondbinding domain）。它可以产生一个抑制或放大信号，来增强CAR-T细胞对癌细胞的特异性识别能力。举例来说，一个CAR-T细胞可设计为被某种靶向蛋白激活，但如果第二个靶蛋白同时出现时它将受到抑制。类似的，它也可以被设计为被两个靶蛋白协同激活。这些方法将进一步增强CAR-T对正常组织和肿瘤的识别特异性。

Juno的“防御型”CAR-T技术，可以在肿瘤微环境中分泌可溶性信号蛋白以增强肿瘤附近的免疫应答，从而可以最大限度地减少全身的毒副作用。比如信号蛋白IL-12，它能够刺激T细胞的活化与招募。由于实体瘤微环境中存在异常强烈的免疫抑制，这对实体瘤的免疫疗法是个很大的挑战。但我们相信“防御型”CAR技术尤其对于实体肿瘤应该有非常好的应用潜力。

来源：源正细胞 作者：翻译：冰糖