CiteAb年度IHC成功供应商Abcam 重磅推出IHC加强验证：不断超越，抗体验证的新高度 免疫组织化学（IHC）是生命科学基础研究及临床组织病理学领域重要的常用实验技术。在药物研发领域，尤其是抗肿瘤药物研发，为了提高研发成功率和缩短研发周期，筛选和鉴定特异、高灵敏的IHC生物标志物的需求日益增长。基于IHC的检测方法可以贯穿于药物研发诸多环节中，如靶点验证、药效学研究、临床I、II、III期等。如果由IHC生物标志物筛选的患者群体显示出对药物治疗明显的获益，那么基于该IHC检测方法开发的伴随诊断将有望指导患者采用最佳的治疗方案。 扫描二维码，下载《IHC加强验证报告合集》
为什么需要充分验证IHC生物标志物检测方法？ 而取决于IHC 生物标志物检测方法开发成功与否的最重要因素之一是所用的抗体需要可靠、充分的验证。在药物研发早期阶段对IHC生物标志物检测方法进行可靠验证，可以帮助更深入理解靶点的作用机制，筛选出最有可能从疗法中获益的病理类型，并有望在临床实践中去应用这种患者选择方案 1。 相反，如缺少抗体验证或抗体验证不充分，则会浪费研发经费和宝贵的时间，以及会误导后续的基础研究/药物研发。据Karen S. Sfanos等观察到的情况，当他们担任期刊审稿人或编辑时，发现在审阅的稿件或他们阅读的文献中，超过50%的IHC染色要么存在明显错误，要么因为使用的检测方法缺乏充分的分析验证，而无法确信染色结果的准确性2。另一项被广泛引用的外部验证研究，涵盖了来自51家不同抗体供应商的近5,500个常用的商业化抗体，结果发现平均验证成功率为49% 3。这使得研究人员在无法获得可靠抗体验证数据时，需要花更多时间、经费去获取，而当所用抗体最后被证实性能不及预期时，整个工作流程将变得非常低效。 CiteAb年度IHC成功供应商Abcam 重磅推出IHC加强验证： 重新定义IHC抗体验证标准 理想的IHC抗体验证提供了充足证据，证明采用经优化后的IHC检测方法获得的相关组织染色结果是由抗体特异性结合到其预期靶标所产生的。然而，这并不是件容易的事，有研究调研显示，虽然其中约80%的研究人员意识到抗体验证的必要性，但约70%的研究人员表示抗体验证太费时间阻碍了他们在研究中进行抗体验证，而约50%的研究人员认为抗体验证成本太高4。 Abcam作为CiteAb的年度IHC成功供应商获奖者，坚信当共同体的一员取得突破时，全体都会受益。Abcam针对IHC应用重组抗体所采用的以下标准验证已经达到了极高的质量标准： 重组技术 实现出色的批次一致性、灵敏度和特异性 广泛大量的应用验证 针对人、小鼠和大鼠样本，采用至少4个TMA、多达55种组织类型 Biophysical QC在分子水平上确认每一批次重组抗体的“指纹“信息 然而Abcam不断超越，还开展了IHC加强验证工作，这些宝贵数据进一步增强共同体对我们重组抗体特异性和灵敏度的信心。目前，我们已推出针对8个肿瘤免疫靶点IHC加强验证报告（数量不断增加中），助力共同体取得进步。
图1 IHC应用重组抗体标准验证和加强验证示例 IHC加强验证根据靶点特点，使用以下验证实验进一步确认抗体特异性： （1）FFPE细胞系 如基因敲除或过表达细胞系、阴性、阳性细胞系
图2 抗TROP2重组抗体 [EPR20043]（👉🏻ab214488）在TACSTD2 WT和KO MCF7细胞系中IHC染色 （2）肽阻断实验
图3 抗Claudin 18.2重组抗体 [EPR19202]（👉🏻ab222512）在人胃组织中IHC染色，一抗经Claudin 18.1或Claudin 18.2合成肽预吸附 （3）ELISA或其它实验
图4 Indirect ELISA显示抗Claudin 18.2重组抗体 [EPR19202]（👉🏻ab222512）特异结合Claudin 18.2合成肽 除上述验证方法以外，每个靶点的IHC加强验证还在多达600例不同癌肿样本中进行验证，以获取详细的抗体IHC染色图谱（见图5）。
图5抗TROP2重组抗体 [EPR20043]（👉🏻ab214488）在不同癌肿样本中IHC染色 靶标染色强度通过手动病理评分与数字化全芯分析相结合的方式进行分析，从而为在疾病背景中评估抗体灵敏度提供了坚实的依据（见图6）
图6 抗TROP2重组抗体 [EPR20043]（👉🏻ab214488）在不同癌肿中IHC染色H-score分析 我们深刻理解研究人员在开发项目早期筛选阶段亟需找到合适的抗体克隆，能特异地、高灵敏地识别结合靶标。为了满足目前和未来研究人员就基于IHC的生物标志物开发和诊断产品开发，Abcam已推出针对8个肿瘤免疫靶点IHC加强验证报告，靶点包含Claudin 18.2, TROP2,EGFRvIII, B7H4, STING, Claudin 6, VISTA, PRAME, 并且涉及靶点数量不断增加中。 扫码下方二维码，您可以获取： 1 完整8个肿瘤免疫靶点IHC加强验证报告（持续更新中） 2 向Abcam反馈其它肿瘤免疫靶点的IHC加强验证报告需求
扫描二维码 获取资源包 见证您的每一次突破 与您一样，我们满怀热忱希望能够带来改变，我们的使命是让您持续前进，帮助生命科学共同体获得可以信赖的实验结果。这就是为什么我们那么专注于质量，从采用重组技术生产抗体、对抗体进行敲除验证到Biophysical QC，再到针对多个肿瘤免疫靶点重组抗体进行IHC加强验证，我们对重组抗体进行全面测试，确保共同体获得稳定可靠的结果，让我们携手前进。 # 参考文献 |
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