中国MSI-PCR伴随诊断试剂盒问世，在同类产品中领先于美国！

2023年11月7日，CMDE正式公开MSI-PCR伴随诊断产品器审报告（左下角“阅读原文”下载）

MSI（微卫星不稳定性）是一种用于癌症检测和治疗的生物标志物，最初用于识别Lynch综合征（遗传性非息肉病性结直肠癌）患者，但近几年已成为预测患者在免疫治疗反应方面的关键指标。

▲ 监管批准MSI作为预测免疫治疗反应关键指标事件

2023年11月1日，国家药品监督管理局（NMPA）批准厦门艾德生物医药科技股份有限公司的“人类微卫星不稳定性（MSI）检测试剂盒（荧光PCR-毛细管电泳法）”产品上市，用于替雷利珠单抗（百泽安，百济神州）的伴随诊断。¹ 值得注意的是，这是我国首个泛瘤种免疫治疗MSI-PCR伴随诊断试剂盒，用于筛选可能从替雷利珠单抗治疗中获益的MSI-H实体瘤患者。同时，也是监管认可的首个同步开发伴随诊断试剂盒。

▲ NMPA批准首个PCR-Based MSI伴随诊断产品

MSI是MMR蛋白功能缺陷导至的结果。

自1993年被发现以来，MSI作为一种生物标志物已经发展了很多年。^2,3 最初，MSI检测被用于识别Lynch综合征患者，但随着MSI肿瘤状态预测对某些类型免疫治疗反应的发现，临床对MSI检测的需求激增。⁴

1997年，美国国家癌症研究所（NCI）首次推荐使用 Bethesda panel 用于MSI-PCR标准化检测，该panel包含2个单核苷酸重复标志物（BAT-25、BAT-26）和3个二核苷酸重复标志物（D2S123、D5S346、D17S250）。检测肿瘤MSI状态时，如果2个或2个以上的标志物不稳定，则为MSI-H（高度微卫星不稳定性），如果只检测1个标志物不稳定，则为MSI-L（低度微卫星不稳定性），如果没有标志物显示不稳定，则为MSS（微卫星稳定）。⁵

2004年，MSI检测进入到下一个关键发展阶段。Promega公司和Mayo诊所对 Bethesda panel 进行修订，合作开发了一个由5个单核苷酸重复标志物组成的panel（BAT-25，BAT-26，NR-21，NR-24，MONO-27；此外，添加了2个五核苷酸重复标志物 Penta-C＆Penta-D 来识别样本混淆和/或污染），提高了检测MSI的灵敏度和特异性。⁶

再下一个MSI检测关键发展阶段，是在2021年。Promega公司在MSI检测中引入了“长单核苷酸重复标志物”，即LMR MSI检测系统。⁷ 新的LMR panel由4个Promega金标准MSI单核苷酸重复标志物（BAT-25，BAT-26，NR-21，MONO-27）和4个长单核苷酸重复标志物（BAT-52, BAT-56, BAT-59 and BAT-60）组成，这种标志物的组合提高了在困难样本中检测MSI的能力。这时候的判读标准也随之发生了变化：8个微卫星标志物中有2个或2个以上不稳定，则为MSI-H；有0或1个不稳定，则为MSS。⁸（具有1个标志物改变的样品相对罕见）

▲ LMR MSI检测系统的判读标准

由于MSI在临床中具有诊断、预后和治疗作用，因此，检测肿瘤MSI状态具有重要临床意义。

目前，在大多数癌症类型中都发现了MSI，其发生频率从0.1%（黑色素瘤）到30%（子宫内膜癌）不等。2017年的一项MSI-NGS检测方法发现，在12,019例癌症患者中MSI-H的发生率为4%。⁹ 2021年的另一项MSI-PCR检测方法发现，在26,464例癌症患者中MSI-H的发生率为3.7%，与之前报道结果类似。¹⁰ 综合可见，MSI-H在泛瘤种中的发生率约为4%。

▲ MSI-H在泛瘤种中的发生频率

MSI检测临床意义：

（1）作为Lynch综合征初筛手段：Lynch综合征患者往往表现MSI-H和/或dMMR表型。

（2）作为II期结直肠癌预后因子：MSI-H/dMMR是II期CRC的独立良好预后因子，对于具有MSI-H/dMMR表型的II期CRC患者，3/4级分化（低分化）不被认为是高危因素。

（3）作为II期结直肠癌辅助化疗疗效预测因子：MSI-H/dMMR表型的II期CRC患者预后较好，不建议使用氟尿嘧啶类单药辅助治疗。

（4）作为晚期实体瘤免疫治疗疗效预测因子：目前，国内外已批准数款免疫检查点抑制剂用于MSI-H的泛实体瘤适应症，MSI作为预测免疫治疗反应的关键指标，将变得越来越重要。

美国：

近几年，MSI-H免疫治疗发展的如火如荼，但FDA尚未批准过任何一款MSI-PCR伴随诊断试剂盒（仅于2022年2月批准过F1CDx MSI-NGS伴随诊断试剂盒¹¹），包括Promega MSI检测产品（尚未在FDA-CDx清单上出现过）。^12,13 在美国，Promega MSI检测产品（OncoMate MSI Dx分析系统，5个单位点）仅被FDA于2021年7月26日通过510(K)审查程序批准用于Lynch综合征的筛查（II类），实质等同对比的是VENTANA MMR IHC Panel。

根据公开新闻显示，Promega公司于2023年10月3日与葛兰素史克（GSK）达成开发dostarlimab-gxly的MSI-H泛实体瘤伴随合作，以期通过Promega的OncoMate MSI Dx分析系统（5个单位点）筛选可能从dostarlimab-gxly治疗中获益的MSI-H实体瘤患者。同时，Promega表示该产品正在通过NMPA的创新审批，预计不久将获得NMPA的批准。¹⁴

中国：

近些年，NMPA已批准4款MSI-PCR试剂盒（桐树生物：2021年1月26日；阅微基因：2021年11月12日；鑫诺美迪：2023年6月28日；艾德生物：2023年11月1日），但前三款MSI-PCR试剂盒的预期用途都是“辅助诊断错配修复（MMR）基因突变的结直肠癌，结合临床其他结果辅助临床医生诊断结直肠癌中的林奇（Lynch）综合征，为及早发现DNA错配修复功能缺陷特征的结直肠癌提供依据。”只有艾德MSI-PCR试剂盒预期用途是泛瘤种免疫治疗伴随诊断，具有重要历史意义。¹⁵

▲ NMPA批准的MSI试剂盒情况

▲ MSI-PCR产品检测位点对比情况

综合来看，艾德的MSI-PCR试剂盒是我国首个用于泛瘤种免疫治疗的MSI-PCR伴随诊断试剂盒，而且在同类产品中领先于美国（尚未有MSI-PCR CDx产品获批上市）。

2023年11月7日，CMDE公开艾德MSI-PCR产品器审报告，下面我们快速了解下其产品信息：¹⁶

产品名称：人类微卫星不稳定性（MSI）检测试剂盒（荧光PCR-毛细管电泳法）

管理类别：第三类

预期用途：本产品用于体外定性检测实体瘤患者福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织样本DNA的微卫星不稳定性（MSI）状态，MSI状态通过检测5个单核苷酸重复标志物进行判定，5个单核苷酸标志物为BAT-26、BAT-25、MONO-27、NR-24和CAT-25。本产品用于替雷利珠单抗的伴随诊断。

检测下限：FFPE ≥25ng DNA，肿瘤DNA含量≥30%的检测限参考品可以准确检出。

样本要求：肿瘤FFPE组织样本，经病理评估确认肿瘤细胞含量不低于30%，FFPE组织样本保存年限不应超过3年，切片厚度应介于5~10μm，切片数不少于5片。对照样本可以是癌旁组织或外周血样本。

阳性判断：2 个或 2个以上单核苷酸重复标志物的片段大小发生改变≥3bp，则检测结果为“MSI-H”；若只有其中 1 个单核苷酸重复标志物片段大小发生改变≥3bp或无单核苷酸重复标志物片段大小发生改变≥3bp，则检测结果为MSI-L或MSS，即“非 MSI-H”。

临床评价：临床试验分为两部分，第一部分为临床检测性能的研究，第二部分为伴随诊断用途的研究。

第一部分性能研究：在温州医科大学附属第一医院、山西省肿瘤医院和中日友好医院三家临床试验机构进行，采用临床参考方法作为对比试剂，入组1,761例实体瘤患者，以样本的MSI-H作为阳性，非 MSI-H 状态作为阴性进行定性统计时，申报产品与对比方法的阳性符合率为100%，阴性符合率为99.7%，总符合率为99.7%。

第二部分伴随研究：该部分研究认可同步开发的伴随药物临床试验证据。针对该部分研究，申请人提供了BGB-A317-209研究资料。在这项临床试验中，共有51例MSI-H/dMMR的实体瘤患者纳入了有效性统计分析，药物临床试验的主要研究终点为客观缓解率，多中心临床试验结果支持本产品伴随诊断预期用途。

综合而言，MSI已成为一种重要的肿瘤生物标志物，用于指导早期诊断、预后评估以及治疗策略的制定。随着分子生物学技术的发展和临床研究的深入，我们对MSI的理解将更加全面和深入。