10月25日是PCR专利日。PCR 技术的出现，彻底变革了生物化学、分子生物学、遗传学、以及现代医学等等。1998 年，《纽约时报》一篇文章提到 PCR 时写道，「生物学以此划分为 PCR 前和 PCR 后两个时期。」。PCR技术的发明人叫凯利·穆利斯（Kary Mullis），他发现PCR的过程也非常传奇。
传奇的 PCR 发现之旅 1979 年，穆利斯在朋友的推荐下，来到一家生物公司 Cetus 公司工作，负责合成寡核苷酸。 在化学上充满天赋的穆利斯很快开发出了计算机自动合成程序，大大简化了工作流程。1981 年，穆利斯当上了实验室的负责人。 1983 年春天的一个夜晚，穆利斯载着在 Cetus 公司工作时认识的女友从旧金山前往乡下度过周末。 汽车行驶在蜿蜒盘旋的 128 号公路上，此时一个念头出现在他的脑海中——扩增 DNA 片段时，如果同时添加两条引物，分别扩增正义链和反义链，那么只要引物足够，岂不是可以无限循环地扩增下去！ 穆利斯马上靠边停车，开始演算，这种扩增方法，每个循环得到的 DNA 都是上一循环的二倍，那么循环 10 次 DNA 就能扩增 1000 倍，循环个 30 次就能达到 10 亿倍！ 这个效率过于惊人，而且这个思路也太简洁了，在反复查阅资料之后，穆利斯依然无法相信之前竟然没人想到过这种方法。穆利斯很快在公司科研会议上分享了自己的新发现，然而并未得到认同。 再加上当时他和女友感情出现问题，这一实验的进度也被严重拖后了。直到 1984 年，在 Cetus 公司的技术员的帮助下，PCR 技术终于获得成功，他们扩增了一个 110bp 的人源蛋白基因片段。并发表了论文。
PCR 技术原理 1993 年，凯利·穆利斯因发明聚合酶链锁反应（PCR）而荣获诺贝尔化学奖。 回顾经典PCR的技术
其特异性强，灵敏度高，方便快捷，对样本纯度要求也比较低。 PCR技术的应用 PCR技术已经广泛应用于基因组研究、分子诊断、基因工程、种群遗传学等诊断医疗领域。其中，常见的应用包括： 1、感染性疾病的分子诊断定性或定量的检测致病微生物的核酸，已经用于病毒、细菌和寄生虫感染的诊断，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。 2、单基因遗传性疾病的基因诊断，PCR技术首次临床应用是检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变。用FQ-PCR检测各种珠蛋白基因表达差异，是地中海贫血诊断的有效手段。 3、多基因病的相关基因的诊断 4、肿瘤相关基因的分子诊断。癌基因的表达增加和突变，在许多肿瘤早期和良性的阶段就可出现。PCR技术能准确检测癌基因的表达量，可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。 5、移植配型和法医学上的应用，世界上绝大多数法医 DNA鉴定实验室主要工作就是应用STR-PCR分型检验技术进行个体识别、亲权鉴定等工作。 目前，PCR技术已经广泛应用于科学研究和医学诊断领域，成为分子生物学和医学领域的重要工具。随着生物技术和医学的不断发展，PCR技术也在不断进化和改进，主要包括以下几个方面： 数字PCR技术： 数字PCR技术是PCR技术的一种改进，可以通过将扩增产物分割成数以千计的小区域来进行扩增，从而提高PCR反应的精度和灵敏度，特别适用于稀有突变的检测和定量。 实时定量PCR技术： 实时定量PCR技术是一种通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化来实现DNA定量的方法，可以实现快速、准确、灵敏的DNA定量分析，特别适用于基因表达和病原体检测等领域。 微流控PCR技术： 微流控PCR技术是一种通过将PCR反应微型化来实现PCR反应的高通量、低成本和快速的方法，特别适用于基因表达和病原体检测等领域。 资料来源：医业观察、生物制品圈，文章内容由“MIR医学仪器与试剂”编辑整理，转载请注明来源。 |
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