肿瘤突变负荷（TMB）作为一个新兴的生物标志物，在预测肿瘤免疫治疗疗效中的作用越来越受到重视。目前TMB的检测方法主要是基于高通量测序平台的全外显子测序和靶向Panel测序的拟合算法，但检测方法、阈值和报告格式缺乏统一标准。此外，TMB值在不同癌种中存在显著差异，也为该标志物在临床中规范应用带来困难。

11月11日，中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会分子病理协作组和肿瘤标志专业委员会遗传性肿瘤标志物协作组联合编撰的《肿瘤突变负荷检测及临床应用中国专家共识（2020年版）》在《中国癌症防治杂志》正式发表，共识围绕TMB的定义、临床意义、检测标准化及与其他免疫标志物如PD-L1、dMMR/MSI-H的关系等要点，为临床提供8条TMB检测及应用共识推荐，以期最大可能提高免疫检查点抑制剂（ICIs）治疗疗效预测的准确性和可靠性。

1、TMB的定义

专家共识：TMB一般是指特定区域内体细胞非同义突变的个数，通常用每兆碱基有多少个突变表示（XX个突变/Mb）。TMB评估受样本质量和数量、检测基因组大小、生信分析方法等多种因素影响，临床应用前应了解TMB的适用范围。不同检测方法获得的TMB应进行系统评估，判断是否具有可比性。TMB数值可反映肿瘤内产生肿瘤新抗原的潜力，与DNA修复缺陷密切相关，在多种肿瘤中dMMR和MSI-H患者具有较高的TMB。

2、TMB的临床意义

2.1 组织TMB可作为免疫治疗独立的疗效预测生物标志物

专家共识：组织TMB（tTMB）是一个新兴的独立ICIs治疗疗效预测标志物，与多种肿瘤类型ICIs单药或两种ICIs联合治疗的疗效相关，已证实可作为泛癌种免疫治疗疗效的预测标志物。推荐既往标准治疗后疾病进展且没有更好替代疗法的实体瘤患者，尤其是高TMB的患者进行TMB检测，有助于扩大免疫治疗获益人群。中国人群 TMB的独立预测价值仍需更多前瞻性研究验证。

2.2 血液TMB与tTMB具有显著相关性

专家共识：目前研究证据显示在NSCLC中血液TMB（bTMB）与tTMB具有显著相关性，但bTMB检测无统一标准。多项回顾性研究发现高bTMB与NSCLC患者接受单药ICIs治疗获益显著相关，但尚未获得高级别前瞻性临床研究证实。

3、TMB检测的标准化

3.1 样本收集、处理原则

专家共识：推荐使用近期石蜡包埋肿瘤组织样本进行tTMB检测，待检测组织应首先完成病理质控并确保恶性肿瘤细胞数能够满足检测要求。为过滤胚系突变对后续tTMB评估的影响，应采集患者外周血、唾液或正常组织作为对照样本。建议优先采用NMPA批准上市的核酸提取试剂盒进行基因组DNA提取，tTMB检测实验室应根据实际需求建立合适的DNA样品质控标准和操作流程，对待测DNA样品纯度、浓度及片段化程度进行严格质控。肿瘤原发灶与远处转移灶组织均可用于tTMB评估。

3.2 TMB检测的Panel设计和平台选择

专家共识：采用靶向测序Panel进行TMB评估时，建议与WES评估的TMB进行一致性评价。靶向测序Panel覆盖范围原则上不应＜1.0 Mb，最低有效测序深度应≥500×。建议进行TMB检测的靶向测序Panel尽可能涵盖患者更多的其他分子遗传信息，包括可指导靶向治疗的驱动基因突变、与基因变异产生相关的免疫治疗正向预测因子以及可能的免疫治疗负向预测因子。目前已有多款NGS测序仪获国家NMPA批准用于临床基因检测，不同实验室可依据样本量、时效要求选择不同测序平台。

3.3 TMB算法的标准化要求

专家共识：基于靶向测序Panel的TMB检测应以WES检测为金标准，纳入影响蛋白质编码的体细胞突变，应保证检出突变频率≥5%的体细胞突变，以保证TMB检测值的准确性和稳定性；应依托ICIs疗效随访数据库对基因组比对和突变检出算法开展标准化研究；Panel检测区域可影响TMB值，应通过至少1 000例WES数据予以校正。同时建议使用对照样本过滤胚系变异。

3.4 TMB阈值的探索与临床应用

专家共识：TMB值在不同癌种中存在显著差异，应依据ICIs临床疗效确定阈值，才能最大可能筛选出ICIs治疗的潜在获益人群。值得注意的是，不同靶向测序Panel的TMB检测体系之间TMB阈值不能通用。

3.5 TMB报告模板的初步建议

专家共识：TMB报告内容除重点描述TMB计算原则和数值外，还应针对癌种的免疫治疗意义进行解读；同时还需系统评估Panel检测的各种驱动基因突变情况，以全面解患者的肿瘤生物学特征，建议应用分子肿瘤诊治专家组模式（MTB）进行临床辅助决策。

4、TMB联合应用展望

作为一个新兴的ICIs治疗疗效预测标志物，TMB在临床应用中还处于初始阶段，检测技术还在不断完善，临床意义也在不断丰富。最近有研究发现，TMB与其他肿瘤免疫治疗相关标志物（如PD-L1、MSI）联合应用，或能提高免疫治疗疗效预测的准确性和精确性，但具体的联合策略还需要进一步探索。

参考资料：

中国抗癌协会肿瘤标志专业委员会遗传性肿瘤标志物协作组， 中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会分子病理协作组. 肿瘤突变负荷检测及临床应用中国专家共识（2020年版）[J]. 中国癌症防治杂志， 2020， 12(5): 485-494.