导读：有些同行对核酸检测市场还不是很清楚，脑海里有个概念，但却很难完整的解释清楚。体外诊断市场很大，分支很多，但核酸检测作为分子诊断领域的常规细分板块，做一些了解还是很有必要！ 核酸检测的原理解读 核酸（我们常说的DNA/RNA）是核酸检测的基础物质，而核酸提取不管是“一步法”还是“两步法”，目的都是要提取出相当纯度的核酸。这也是整个核酸检测行业绕不过去的步骤，很多时候一份临床样本的核酸提取纯度高低，甚至直接决定了检测结果的有效性。
图片来源于：网络 现在一般有手工提取和仪器自动提取两种方式，手工提取如：酚/氯仿抽提法、醇沉淀法、层析柱法（RNA提取用的较多的方法）、热裂解碱法、煮沸裂解法等。仪器提取就是我们现在市场上大面积推广的核酸提取仪，这也是现阶段和未来二三级医院需求面很广的仪器。 其实核酸提取仪就是为了减少手工提取的繁琐性和提高纯度。基本提取步骤还是和手工法一样，需要经过裂解和清洗，最后得到纯度相当的核酸。其实对于核酸提取的理解，我们可以通过个形象的例子来解读，一个是我们吃核桃，裂解这一步，其实就是为了释放核酸，而把核桃敲碎暴露出核仁就相当于把细菌/病毒“敲碎”暴露出核酸。而清洗这一步，就是为了把杂质清洗干净，得到纯度相当的核酸，然后再进入实时荧光PCR仪上进行扩增。 说到这里，我们就得弄明白实时荧光PCR是怎么一回事？又是如何得到定量/定性结果的？专业解释是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 展开来讲就是：将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性、低温复性、适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光；随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得Ct值（Cycle threshold，循环阈值，每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数），同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
图片来源于：网络 这么讲可能你还不能完全理解，那你可以这么去理解，一个实时荧光定量PCR仪，最关键的是两大系统，一个光电系统，一个温控系统。光电系统是用来进行光电信号收集和转换的，温控系统是用来维持核酸扩增所需对应温度条件的。最后电脑自带软件系统会通过相关关系方程式换算出临床定量结果，比如测的是乙肝核酸定量监测项目，那最后报告单上显示的就是乙肝病毒的核酸定量结果。那这个核酸定量结果有什么用了？这就涉及到核酸检测的应用了。 核酸检测的市场应用 需要深入了解其市场应用的话，我们得接着前面的话题再啰嗦几句，乙肝核酸的定量结果有什么用了？这里我们要清楚两个问题，一个是得了乙肝（俗称：小三阳，大三阳）的话，临床是怎么确诊患者得了乙肝了？那就是通过“两对半”进行确诊，也就是酶联免疫法，这个是定性的。就是确诊是不是得了乙肝。
图片来源于:网络 那确诊之后了？临床医生会给患者开抗病毒药物，患者吃了药物之后，回来复查就得查乙肝核酸定量检测项目了。也就是通过实时荧光PCR方法定量出患者体内乙肝病毒的含量，清楚患者所吃的药物是不是达到了抗病毒治疗的效果，如果效果好，那检测出的定量结果会看到患者体内的病毒含量明细降低了。这样我们就清楚了他的市场意义。
图片来源于：视觉中国 如今核酸检测应用很广泛，最终是体现在检验科的基因扩增实验室开展的核酸检测项目。比如：乙肝病毒核酸检测、丙肝病毒核酸检测、手足口、性病三项等等，具体项目分类有哪些，我们可以看看这篇文章：“60余项检验科分子诊断检测项目总览”，其实就是说的核酸检测在检验科基因扩增实验室开展的项目汇总表。然而，核酸检测开展的范围并不仅仅是医院检验科，三甲医院有些生殖科、皮肤科、分子医学中心、疾控中心、血液中心等等也会开展核酸检测，只是开展的方向不一样罢了。具体我们可以研读这篇文章："行业观察：血站核酸血筛市场与疾控、临床核酸检测市场分析与解读!"进行全面的了解！ 通过全文的分析和讲解，相信您对核酸检测领域有了自己的认识和理解，在工作中遇到这类话题，是不是也能聊上几句了，下期精彩干货内容，敬请关注！ |
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