科研｜开发实时酶重组酶扩增试验和与侧流试纸结合的ERA联合试验，用于石斑鱼肠道微孢子虫

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在水产养殖的广阔天地里，病害的精准检测与有效防控，始终是守护产业蓬勃发展的坚固基石。最近，作者团队在石斑鱼肠胞虫检测技术方面取得了重大突破，相关研究成果发表于 “Development of a Real - Time Enzymatic Recombinase Amplification Assay (RT - ERA) and an ERA Combined with a Lateral Flow Dipstick (LFD) Assay (ERA - LFD) for Enteric Microsporidian (Enterospora epinepheli) in Grouper Fishes” 这一专业科研论文中。现在，就让我们一起深入探索这项具有深远意义的技术突破。

研究背景：

石斑鱼肠胞虫（Enterospora epinepheli）堪称石斑鱼养殖业的头号劲敌。一旦石斑鱼不幸感染，便会出现厌食、肠壁变薄、鱼体极度消瘦等症状，严重时甚至会导至大规模死亡，给养殖户带来难以估量的经济损失。而且，随着石斑鱼养殖规模的持续扩张，石斑鱼肠胞虫的传播风险也在不断攀升，形势愈发严峻。

介绍：

先达基因此次重磅推出的实时酶促重组酶扩增检测法（RT - ERA），以及 ERA 与侧流试纸条（LFD）相结合的检测法（ERA - LFD），无疑为石斑鱼养殖业注入了一剂强心针。

方法：

RT - ERA 技术巧妙利用重组酶，在等温条件下高效启动核酸扩增反应，能够快速、精准地检测出石斑鱼肠胞虫的特定核酸片段。

作者团队RT-ERA方法使用了GenDx ERA荧光核酸扩增试剂盒KS103。阳性模板的扩增曲线呈“S”形，而阴性对照则未观察到扩增。Ct值在扩增曲线的交点处确定，阈值设定为300 CFU。曲线在对数阶段的斜率表明其陡峭程度，而平台期的荧光强度反映了最终的荧光值。

ERA - LFD 检测法则进一步简化了检测流程，将 ERA 扩增产物与侧流试纸条相结合。检测人员只需观察试纸条上的条带，就能直观判断石斑鱼是否感染肠胞虫。

作者团队使用了GenDx ERA测试纸核酸扩增试剂盒KS105和侧流测试条TS101在7~10 min后读取结果。仅在对照区显示一条可见蓝线的试纸条被视为阴性，而对照区和检测区各有一条可见蓝线（红色）的试纸条则被视为阳性。反应强度由检测线的颜色深浅决定，颜色越深表示反应强度越强。

对比：

与传统的石斑鱼肠胞虫检测方法，如常规 PCR 和基于 Taqman 探针的荧光定量 PCR 方法相比，先达基因的这两项新技术优势显著。传统 PCR 方法操作复杂，需要专业技术人员和昂贵的仪器设备，且检测耗时较长，难以满足现场快速检测的迫切需求。而先达基因的 RT - ERA 和 ERA - LFD 技术，不仅检测速度快，能在短时间内给出结果，而且灵敏度更高，能够检测到更低浓度的石斑鱼肠胞虫核酸，极大降低了漏检风险。

总结：

目前，先达基因的这两项石斑鱼肠胞虫检测新技术已经在实际生产中初露锋芒，取得了令人瞩目的成果。在多个石斑鱼养殖场的实地测试中，这些技术精准检测出了早期感染石斑鱼肠胞虫的鱼群，为养殖户及时实施隔离、治疗等防控措施提供了有力支撑，有效遏制了病害的传播，减少了经济损失。

原文链接：

Development of a Real-Time Enzymatic Recombinase Amplification Assay (RT-ERA) and an ERA Combined with a Lateral Flow Dipstick (LFD) Assay (ERA-LFD) for Enteric Microsporidian (Enterospora epinepheli) in Grouper Fishes