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双抗夹心胶体金试纸条求助!!!!
正在做双抗夹心胶体金试纸条抗原检测方法。
目前的情况是,已经筛选出来两株单克隆抗体,分别针对这个病毒的两个不同的衣壳蛋白。也已经做了双抗夹心ELISA方法,是可以实现ELISA结果的。而且用病毒包被板子是可以实现间接ELISA方法检测的。也用8M尿素法去测定了抗体的亲和力情况。但是目前的情况是,在这个双抗夹心的方法在试纸条上实现不了,T线总是结合不上。
目前怀疑的情况有以下几点:
1.抗体的问题,一个是单克隆抗体还没有经过纯化,还是腹水的状态下,用该状态下的腹水去偶练胶体金,包被T线,是否会对试纸条法的建立产生影响。
2.试剂问题,我们实验室之前建立起来的胶体金检测方法是抗体的检测方法,是不是抗原胶体金检测方法的试剂和抗体胶体里检测方法的试剂不同,比如样品垫的处理液不同。
3.现在还有一个疑惑是,不知道在胶体金方法上,金标抗体能否捕获到病毒,然后推动病毒去和T线上的抗体结合。
有没有什么好的方法,去判定金标抗体能否和病毒结合
原文地址:https://www.zhihu.com/question/14581603672 |
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