干货分享 | 实验室必备：合适的血清才能有优秀的细胞！ | MCE

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你以为细胞在培养皿里只是"躺平"？错！它们可是妥妥的"美食家"。血清——来自血液的黄金液体，就是细胞的满汉全席！

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血清: 细胞的“五星级外卖”

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后，分离出的淡黄色透明液体。

血清核心作用有哪些?

首先，血清可谓细胞食堂！氨基酸、葡萄糖、维生素、脂质、微量元素……营养直接拉满，细胞干饭不摆烂！

血清还是贴壁神器！纤维连接蛋白、层粘连蛋白等——贴壁细胞的“强力胶”，防止细胞“躺平变圆” (拒绝 996，但贴壁必须稳)。

当然，血清还是实验 Buff：病毒培养、杂交瘤存活、冻存保护……血清在手，科研不愁！

细胞的“米其林厨房”如何炼成?

血清生产流程：血液采集 → 凝固分离 → 三级过滤 → 质检分装 → 冷链配送。

图 1. 血清生产流程图。

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质检内幕:

血清届的“魔鬼面试”

你以为血清随便就能上岗？它可是要过五关斩六将！涵盖质量监控、微生物验证、生化检测等诸多环节。当然，实践出真知！经过客户实践验证的血清才是好血清~

血清的质量检测

血清的客户验证

表 1. 文献研究中的血清使用及培养参考。

实验验证 1：趋化实验

实验细胞株：THP -1 cells

培养基：RPMI 1640 +10% FBS +1% P/S

细胞密度：1.5×105 个/孔

培养时间：4 h

实验结果：Mouse MCP-1 有促进 THP-1 细胞正向定向迁移，且呈现出浓度依赖性。

图 2. 探究 Mouse MCP-1 对 THP -1 趋化的影响。

实验验证 2：细胞生长

实验细胞株：SH-SY5Y cells

培养基：DMEM/F12 培养基 +15% FBS +1% P/S

细胞密度：4.5×103 个/孔

培养时间：48 h

实验结果：Human Neurofascin 可以促进 SH-SY5Y 细胞突触延伸。

图 3. 探究 Human Neurofascin 对 SH-SY5Y 细胞突触的影响。

实验验证 3：划痕实验

实验细胞株：AGS cells

培养基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

细胞密度：2×106 个/孔

培养时间：24 h

实验结果：Human GRIK 抑制 AGS 细胞的损伤后的“愈合”作用。

图 4. 探究 Human GRIK2 对 AGS 细胞运动的影响。

实验验证 4：细胞增殖实验

实验细胞株：Balb/3T3 cells

培养基：DMEM +10% FBS

细胞密度：3×103 个/孔

培养时间：48 h

检测试剂：CCK8

实验结果：Human Amphiregulin 可以促进 Balb/3T3 细胞的增殖，ED50=14.39 ng/mL。

图 5. 探究 Human Amphiregulin 对 Balb/3T3 细胞增殖的影响。

实验验证 5：Transwell 迁移实验

实验细胞株：PC-3 cells

培养基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

细胞密度：7×104 个/孔

培养时间：24 h

实验结果：Human Androgen receptor 抑制 PC-3 细胞的迁移，随着浓度增加，迁移呈现负趋势。

图 6. 探究 Androgen receptor 对 PC-3 细胞迁移的影响。

MCE 血清在各细胞系中的验证

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灵魂拷问:

血清使用的终极难题

1. 血清应该如何保存？

经常使用的血清分装后保存在 -20℃ 即可，长期保存建议保存在 -80℃。反复冻融会导至血清有沉淀析出，建议将大规格血清分装成单次使用规格后保存，按需取用。

低温保存，拒绝反复冻融！！！

2. 血清应该如何解冻？

解冻时需要从低温中取出后，放置于 2-8℃ 冰箱中缓慢解冻，在溶解过程中避免剧烈震荡，可隔一段时间，缓慢晃动，混合溶解成分并加速溶解过程。不可将血清直接从低温拿到室温/25-37℃ 环境中溶解，巨大的温度变化容易使血清产生絮状沉淀，且长时间放置在室温/25-37℃ 环境中，容易使血清中活性物质发生变化，影响细胞生长等。

缓慢升温，拒绝暴力摇晃！！！

3. 血清溶解后的沉淀是什么？

血清中出现的沉淀物质可能包括纤维蛋白 (絮状沉淀)、脂蛋白、冷凝集素、玻连蛋白、胎球蛋白、磷酸钙与草酸钙 (显微镜下小黑点沉淀) 及胆固醇等。

4. 血清在使用之前需要再次过滤？

血清在生产过程中严格执行三级过滤 (0.1 μm)，标准的无菌操作，不建议在使用前再次过滤，再次过滤可能会导至血清中营养物质减少。

5. 血清在使用前是否需要热灭活？

热灭活是指在 56℃，30 min 处理已经完全解冻的血清，热灭菌可以使血清中的补体去活化。热灭活血清对于细胞生长只有微小的促进作用或者没有作用，但通常会导至细胞生长速度慢，血清中 沉淀物显著增多等问题。非必要，不建议热灭活。

6. 我要替换我现在使用的血清，应该怎么操作呢？

细胞对于日常培养条件具有适应性，贸然打破会导至它不适应新的生活环境，需要先进行驯化。建议复苏细胞使用原品牌血清，传代 1-2 代，细胞状态稳定后，新血清：原血清=1:3 进行第一次换液，新血清逐代提高至 50%，75%，100%，过程注意监控细胞状态，稳定情况下传代，且需要保持较高的传代密度。

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小结

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参考文献：

[1] Yang J,et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 2025 Jan 29;16(1):1160.

[2] Han H, et al. Therapeutic potential of monomethyl fumarate and aluminum ion combination in alleviating inflammation and oxidative stress in psoriasis. Redox Biol. 2025 Feb;79:103482.