Western blot 染出了条带，显影无条带

莺歌燕舞

THP-1 细胞做western blot 上样量30ug,40ug,50ug,60ug,70ug. Coomassie blue 和Ponceau S 都染出了条带，5% skim milk TBST 室温封闭一小时，一抗过夜，TBST 洗X3，二抗室温1小时，TBST洗X3，ECL200ul white+200ul black 显影。没有条带，还有点脏。。。内参也没有，太丧了，求大神指点！



coomassie blue staining



Ponceau S staining



chemi +colormetric

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