求助PCR电泳图怎么分析？

检验之星

求助PCR电泳图怎么分析？
原文地址：https://www.zhihu.com/question/297382602

清风寡欲

最右边是marker，咋分析呀

大力水手

DNA浓度太大的话需要稀释

大力水手

我们以这副很丑的图为例，第五条泳道是marker，用来指示DNA大小，电泳必跑，如果PCR产物大小对了，有很大可能性你P出来了对的东西。但是有很多其他问题需要注意，比如：
123泳道有不止一条带并且有弥散，这种情况的可能原因是DNA量太多，或者产物太大用了不合适的胶浓度。如果弥散而且条带还不亮，那可能并没P出来正确的东西。
第4泳道我们发现最底下有超亮条带是由于过多的SDS引起的，SDS把胶中的染料带跑了，所以上面的条带有足量的DNA但是不亮。有时候各种buffer里面的成分会影响条带需要注意。
第6泳道就是什么都没跑出来。
一般PCR产物跑完会在100bp以下有一条淡而弥散的条带，是引物二聚体，P很小的产物时需要注意不要弄混。
有时候有很多条带只有一条大小是对的：说明引物特异性不好，需要重新设计或者提高退火温度。
在正确条带倍数大小出现条带：说明overamplify了，可能引物的量不够。

感恩由您

PCR电泳图的话就是比大小，跑一个marker，marker说明书是标识了每天带的大小的。然后对比你的产物条带与marker接近的条带，看看大小对不对。