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高通量流式细胞仪推荐那款可以选?
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高通量流式细胞仪推荐那款可以选?
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雷达卡
发表于 2025-2-27 12:06
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流式细胞分选简介
( sorting)是根据细胞所具有的特性将某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是细胞学研究的重要课题。在需要对某种特定的细胞进行功能分析时,如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞分子、细胞共培养检测细胞功能等研究都以获得高纯度的目的细胞为前提。常见细胞分选的方法有两大类:一类是基于免疫识别特性的方法包括流式细胞分选和免疫磁性细胞分选;另一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法,它主要是由于不同细胞群之间存在沉降系数差异,在一定的离心力作用下不同种类的细胞会以各自不同的速度沉降,在密度梯度不同的区域会形成区带,从而实现分选目的,但分离得到细胞纯度低且特异性差导致应用较少。本文重点介绍流式细胞分选方法。
流式细胞分选是在流式细胞术检测细胞表型的基础上,使用充电分选技术以实现多种特定表型细胞的分离。具有分选参数多、群体多、纯度高、灵活性强等优势。分选后细胞可做进一步分子生物学研究如荧光定量PCR、WB、细胞培养等。
分选型流式细胞仪一般由液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统4部分组成。分选功能是通过鞘液流形成的含有细胞的带电液滴而实现的,在流动室的喷嘴上装有一个高速振荡器,该装置充电后以每秒几万次的振动频率使鞘液流成为上万个液滴,细胞在进入液滴之前已经被测定,如果其特性与被选定要进行分选的细胞特性相符,则仪器会对此细胞形成液滴时给整个液柱充以指定的电荷(对标有荧光素的细胞液滴带以负电荷;未标记荧光素的细胞液滴带以正电荷;而不含有细胞的液滴则不被带电荷)。
这样,当被选定的细胞形成液滴时就带有特定的电荷,未被选定的细胞和空白液滴不被充电,即不带电荷。当充以不同电荷的含细胞的鞘液流经带有正负几千伏恒定电场的偏转板时,就根据自身所带的电荷性质产生偏差而落入各自的收集管中,不带电荷的液滴就进入废液槽中,从而实现细胞分选的目的。
流式细胞分选的应用
基于流式细胞术的技术基础,根据颗粒特性实现细胞分选而广泛应用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学、血液学、药物开发以及环境检测等各方面科学研究和工作中。例如:
(1)用于分选外周血细胞:根据细胞的大小以及颗粒度等特征,对白细胞直接进行分选获取人外周血单核细胞,既避免了多次重复离心,又能分选得到纯度80%-90%之间的单核细胞用于后续实验,为深入研究单核细胞提供了良好的平台;
(2)用于分选染色体:能得到高质量的单个染色体,且在实验的同时纯化大量染色体,为后续实验提供了方便;此外还包括干细胞组织研究、移植和细胞治疗研究以及疾病细胞的发生、发展研究等。
流式细胞分选仪市场主要品牌
本文整理了市场上一些主流的流式细胞分选仪品牌以及其代表产品,排名不分先后。
BD碧迪
1
代表产品:BD FACSCalibur流式细胞仪。
1973 BD推出全球第一台商业化流式细胞仪,确立了在细胞学研究领域的领先地位。1995 BD生产出当今世界唯一的全自动四色流式细胞分析分选仪。2008 BD推出升级型流式细胞分选仪BD FACSAria II。BeckmanCoulter贝克曼库尔特
2
代表产品:贝克曼库尔特DxFLEX流式细胞仪、贝克曼库尔特Navios流式细胞仪。
贝克曼库尔特诊断事业部是体外诊断领域的世界领导者之一,为全球的医疗机构及实验室提供智慧检验解决方案,致力于推进医疗服务至每一个人。公司总部位于美国加州布瑞亚,拥有近90年的悠久历史,自2011年起开始作为丹纳赫医学诊断平台的重要运营公司开展业务,在40多个国家拥有超过11000名员工。
作为最早进入中国市场的国际体外诊断公司之一,贝克曼库尔特早在上世纪70年代就开始在中国设立销售处,并于1981年在北京建立技术中心,1997年在苏州建立试剂工厂“贝克曼库尔特实验系统(苏州)有限公司”,成为最早在中国建设工厂的国际体外诊断公司之一。2015年,贝克曼库尔特又在苏州建立了仪器工厂和研发中心,为中国和全世界开发卓越的诊断产品与解决方案。
公司主要产品包括流式细胞仪、离心机、实验室自动化系统、颗粒与细胞分析仪器等,其产品主要用于前沿的重要研究领域,包括基因组学、蛋白质组学、细胞组学以及生物制药等。Agilent安捷伦
3
代表产品:安捷伦艾森Novocyte流式细胞仪。
安捷伦流式细胞仪可提供出色的功能、高质量数据以及易于使用的平台,为研究人员节省采集和分析数据所用的时间。
Miltenyi Biotec美天旎
4
代表产品:MACSQuant Tyto流式分选仪。
美天旎MACSQuant Analyzer 10 流式细胞仪是小体积紧凑型流式细胞仪,可将仪器整体置于超净工作台或生物安全柜中,既保证样本不受外界环境污染,更能够保护操作者的安全,避免操作者被有生物危害性样本污染。对于样本和操作者来说,起到双向保护作用。对于无生物安全危害的实验室,则不需要为仪器安装定制特殊实验室或特定规格的实验台。Cytek厦泰
5
代表产品:Cytek Aurora CS 全光谱流式细胞分选仪
Cytek 流式细胞仪--Aurora使用全新的全光谱检测技术,不再受限于传统流式细胞技术,配备高灵敏度粗波分复用(CWDM)半导体检测器阵列。Aurora具备在任何复杂的实验中提供高质量数据结果的性能,可以轻松分析稀有样本和弱阳性样本。ThermoFisher赛默飞
6
代表产品:Attune NxT声波聚焦流式细胞仪、Bigfoot 全光谱超高速流式细胞分选仪和Attune CytPix成像型流式细胞仪。
赛默飞旗下的子品牌Invitrogen通过卓越的流式产品和工具为流式细胞分析和功能检测提供完整解决方案,帮助科研工作者得到高质量结果、节省实验时间,以加速您的科学研究。深圳迈瑞
7
代表产品:迈瑞BruCyte流式细胞仪
作为流式细胞仪自动化设计革命性的开端,BriCyte E6流式细胞仪提供全方位多角度智能化自动软件,简化临床流式操作的复杂程度,方便临床用户学习使用。
提供淋巴细 胞亚群四色分析和HLA-B27双色分析的自动化软件,可实现"生成样本单——选择检测项目——开始检测"三步一键式解决方案完成淋巴细胞亚群分析和HLA-B27检测临床 检测项目,极大地简化操作流程,提高临床用户的工作效率;对于手动软件分析可提供自动电压和自动补偿一键式仪器设置功能,简化手动操作调节仪器分析条件的难度, 提高临床用户的工作效率。
深圳唯公
8
代表产品:EasyCell流式细胞仪
唯公科技,由李为公博士于2016年8月份创立。唯公科技主要的产品方向包括:流式细胞分析自动化和高通量荧光免疫分析(液相芯片)技术。李为公博士,曾担任过美国贝克曼库尔特(BCI)公司体外诊断研发中心首席工程师、迈瑞北京研究院总经理(2010年加入迈瑞)。
北京指真
9
代表产品:MoniSight科研型流式细胞仪、CytoFocus临床型流式细胞仪、
CytoPOC便携式临床型流式细胞仪。
北京指真生物科技有限公司成立于2017年,坐落于北京经济技术开发区,是一家致力于为体外诊断用户提供优异的血液学检测仪器、试剂及服务的高科技公司。
常州必达科
10
代表产品:必达科BeamCyte系列流式细胞仪。
常州必达科生物科技有限公司成立于2013年12月,是一家专注于全自动化流式细胞仪及流式临床试剂研发、生产和销售于一体的国家高新企业。深圳达科为与常州必达科,在流式细胞仪开发上有合作。
博奥新景
11
代表产品:Cytonova流式细胞仪。
博奥生物集团有限公司暨生物芯片北京国家工程研究中心(简称"博奥生物") ,是清华控股的核心企业,是在国务院、发改委、科技部、教育部、卫生部及北京市领导的关心和支持下,以清华大学为依托、联合华中科技大学、中国医学科学院、军事医学科学院,于2000年9月30日注册成立的。博奥生物的流式细胞仪已广泛应用于生物医学基础和临床研究领域,在免疫学、血液学、肿瘤学等学科也得到广泛应用。利用流式细胞仪对细胞表面的抗原成分进行标记分析,可区别多种细胞的特性,为细胞免疫的研究也提供了更有效的途径。
中生医疗
12
代表产品:ZS-SE7S流式细胞仪。
中生(苏州)医疗科技有限公司成立于2009年5月22日,注册资本6050万人民币,是中生北控集团旗下一家致力于体外诊断仪器设备研制的高新技术企业。公司位于苏州城高新区中国江苏医疗器械科技产业园,主要从事各种医疗检验仪器及其相关器件的研发、制造、销售及技术服务。
2016年8月,中科院苏州医工所承担的国家863计划重大项目"医用新型流式细胞仪研制"获得了国家验收,中生(苏州)医疗科技有限公司获得了该技术的转让,开始流式细胞仪研发、生产、销售。
赛雷纳
13
代表产品:Sparrow流式细胞仪。
赛雷纳(中国)医疗科技有限公司是一家拥有先进基因检测技术的公司,公司技术总部位于美国加利福尼亚州的圣迭戈市。公司创始人张海川,1997年获得清华大学精密仪器与机械专业的博士学位。赛雷纳(中国)于2013年在成都设立总部。
厦门福流生物科技有限公司(厦门大学颜晓梅教授课题组)
14
代表产品:Nano-Flow Cytometry纳米流式检测仪。
公司拥有自主研发的纳米流式检测技术(Nano flow cytometry, NanoFCM)的相关知识产权,致力于纳米流式检测技术的技术产业化,服务科学研究、生物医药、工业生产、环境监测、检测过程。
商品化的纳米流式检测仪已经成熟,填补了国际空白,客户遍布全球顶级机构,在国际上享有盛誉,具有非常好的市场前景。如Mayo Clinic、MD Anderson Cancer Center、约翰·霍普金斯大学医学院、美国国立卫生研究院(NIH)、牛津大学、帝国理工学院、苏黎世大学、哥德堡大学、马尔堡大学、伦敦玛丽女王大学、台湾大学、悉尼大学、昆士兰大学等全球顶尖研究机构和Codiak Biosciences、EVOX、LONZA、Novo Nordisk、百时美施贵宝、Evotec、Astellas等高科技生物制药公司均已采购成为NanoFCM的客户。
泛肽生物
15
代表产品:DiagCyto流式细胞仪
泛肽生物科技(浙江)有限公司,是一家专业从事体外诊断产品的研发、生产和销售的高新型医疗器械企业。泛肽生物主要基于流式细胞技术,以诊断试剂+诊断仪器为支撑,为医疗机构提供临床诊断综合解决方案。
细胞分选的自动化
随着细胞分选技术等不断进步,国内外厂家也在不断加大细胞分选仪器的研发力度,新一代全自动细胞分选仪不断相继问世。国内优秀企业也开始崭露头角。
苏州欣协生物科技有限公司自主研发的SophCyte™Kunlun全自动细胞制备一体机,不仅实现了全自动细胞分选的功能,更是集清洗、离心、分选、培养等功能于一体,搭配全封闭管路,可实现细胞制备过程中的高度集成化、规模化、自动化和国产替代化,保证细胞产品质量的一致性和稳定性,有效降低企业的研发成本和洁净厂房的运维成本,满足多种细胞产品的制备需求。
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发表于 2025-2-27 12:06
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高通量的流式细胞仪其实包含三个部分,样本制备的高通量,上样检测的高通量,数据分析与管理的高通量。
这三块分别有很多的厂家和型号的仪器,但是如果是从平台负责人的角度还是推荐你去了解下贝克曼库尔特的解决方案。
样本制备阶段,Beckman的自动化可以很高效的完成前处理,如果不用自动化,干粉试剂也是一个很好的选择。并且他家的自动化是可以和流式连用的。
而样本检测,CytoFLEX也有孔板上样器,不管是普通孔板还是深孔板都能支持。
最酷的是在数据分析的部分还能借助机器学习算法进行分析,并且还有自动圈门等功能,为高通量的数据分析提供除了人工分析外的另一种可能。
所有的数据都可以在云端进行安全的保存与备份,如果要和异地的兄弟公司进行数据协作也会非常方便。
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发表于 2025-2-27 12:06
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和义广业【行业分析】之流式细胞仪,
将系统介绍流式细胞仪究竟是什么?它可以做什么?它的市场行情怎么样?有哪些国内外的大厂都在该领域有所布局?
本篇将系统介绍占据国内高端流式市场的国外大厂都有哪些明星产品、产品的详细情况等。
流式细胞仪及试剂相关公司
在国际市场上,流式细胞仪供应商有美国BD、美国贝克曼、德国默克、美国赛默飞世尔、美国安捷伦等,国内生产商有深圳迈瑞、重庆博奥新景、深圳唯公生物、苏州中生医疗、常州必达科、上海厦泰生物、广州竞天生物、塞雷纳医疗等(如下图),下面就占据国内市场的几家公司及产品进行详细介绍。
图 流式细胞仪相关公司
(一) BD(Becton,Dickinson and Company)
美国BD
是世界上最大的研发、生产和销售医疗设备、医疗系统和试剂的医疗技术公司之一,其业务共分为三大类: 医疗、生物科学、诊断,其中生物科学板块产品有流式细胞仪、生物科学研究试剂、细胞培养及实验室耗材等。
BD公司流式产品占据超过40%的全球市场份额,
拥有包括分析型流式、分选型流式、流式液相芯片等,其型号种类包括FACSort、FACSCanto、FACSViaTM、FACSPresto等多种不同类型。现就其中几种进行详细介绍。
1、临床细胞分析仪
以 FACSCanto™ II 为例进行详细介绍:
BD FACSCanto平台使用简便,功能强大,如固定的流动室设计使得开机设置的时间大大缩短,数据重复性更高;而专利的光路设计则进一步增强了信号检测能力,尤其在多色实验中,每一个颜色的检测灵敏度和分辨率进一步得到提升。
特点:
三激光器(488nm-633nm-405nm)配置实现6色及以上荧光分析;
采用光胶耦合技术将流动室和荧光接受物镜相连,扩大数值孔径同时避免光信号损耗,提高荧光灵敏度;
接收系统采取先收集波长最长的弱信号,再收集波长最短的荧光信号,保证是高效的荧光信号收集;
荧光灵敏度:FITC<12MESF,PE<11MESF;
荧光分辨率:最大检测颗粒直径为50 µm;样本交叉污染率<0.1%;
最小样本量≤50 µL,适合微量样本和稀有样本的检测(如婴幼儿血液);
配置自动进样系统,实现样本采集的自动化操作;
独立液流车系统,保持液流稳定;
专门配备FACS Canto临床软件,可自动检测、分析,生成实验报告。
应用:
免疫学功能研究(包括淋巴细胞免疫表型分析、细胞绝对计数、细胞活化、细胞因子、调节性T细胞、树突细胞、抗原特异性T细胞、Th17细胞等);
抗体研发中应用(克隆筛选、特异性评价、活性评价、功能性研究、基因工程抗体研究);
药物筛选(功能性化合物筛选、药物机制、药理学研究、药物毒副作用研究;
微生物鉴定、活性分析。
2、研究细胞分析仪
以 LSRFortessa™ 为例进行详细介绍3:
BD LSRFortessa™ 流式细胞分析仪具有精确的重复性和稳定性,为分析型流式细胞用户的提供了更高端的选择。
特点:
数据处理系统:全数字化数据处理;荧光信号补偿可进行在线补偿,脱机补偿;
可实现4激光(488nm、640nm 、561nm、405nm)14色分析16参数检测;
采用光胶耦合石英杯激发方式,稳定性光路系统,仪器即开即用,光路无需调校;
荧光信号采用全光纤传递和收集光信号,保证荧光信号接收均一和稳定,确保多色分析的高灵敏度和一致性;
荧光检测灵敏度:可达到80MESF(FITC),30MESF(PE),可精确检测极弱信号;
CV值<3%;
分析速度:40,000-70,000个细胞/秒。
应用:
细胞表面标志的检测:细胞免疫表型分析、其它表面蛋白分析等;
细胞内蛋白的检测:细胞因子、细胞骨架分子和胞质酶类等;
细胞内离子浓度检测:H+、Na+、K+、Ca2+等;
细胞核成分检测:细胞周期、DNA总量分析等;
细胞膜:流动性、膜电位、膜通透性等;
细胞功能:如细胞死活判定、pH值、增殖与凋亡、抗药性等;
基因表达:内源及外源基因表达,荧光报告基因的表达和转染效率判定。
3、科研细胞分析仪
注:* 通过特殊定制的科研产品可以提供更多的激光器选择
以 FACSAriaⅢ 为例进行详细介绍:
BD FACSAria III 流式细胞分选仪具有许多的技术专利,其多色性能以及简便易用的优势也为更多的科研工作者打开了复杂的细胞分析的大门,是国内较受欢迎的一款分析仪(如下图所示)。
特点:
激光:可选的激光器包括488nm蓝色激光器、633nm红色激光器、405nm 紫色激光器、561黄绿激光器、405紫色激光和355激光,激光器互不共线;
检测参数:9色荧光(最多18种颜色)和前向散射光、侧向散射光共11个检测通道;
激发光路系统:激光固定校准光路系统,开机无需手动调整光路;
荧光检测灵敏度:FITC:90 MESF, PE:30 MESF;
分选系统:最大分选速度≧70,000个细胞/秒,可进行1-4路分选;
液滴时间延迟:自动确定、实时监测液滴时间延迟,不需要用显微镜肉眼观察进行繁琐的人工设定;
分析软件:自动获取数据并可脱机进行全数字化分析、处理,可免费升级。
应用:
定性、定量分析细胞膜、细胞质和细胞核中的各种细胞成分;
研究细胞的各种功能状态,如细胞增殖、细胞凋亡、细胞分化、氧化还原状态、吞噬性等;
可将具有特定形状或功能的细胞从混合细胞群体中分离出来,再进行分析或培养。
(二)BCI(Beckman Coulter)4
Beckman Coulte隶属于世界最大的精密仪器制造商丹纳赫集团,它在临床诊断和生命科学领域处于世界领先水平。公司生产的流式细胞仪有全球第一台五色数字化流式细胞仪Cytomics FC 500、第一台具有仪器内部温度控制的流式细胞仪Gallios、第一台十色临床型流式细胞仪Navios、第一台超高速六路分选的高端流式细胞分析分选系统MoFlo XDP、以及最新的通讯技术与流式技术结合的CytoFLEX流式细胞仪,均使流式实验操作更简单,实验时间更快速,实验结果更精准。
1、临床型流式细胞仪
临床型流式细胞仪主要为高通量实验室优化工作流程的高级细胞计数应用,产品包括DxFLEX 流式细胞仪和Navios 流式细胞仪,其具体情况在下面做详细描述。
(1) DxFLEX 流式细胞
DxFLEX是全新的临床型流式细胞仪,其高灵敏度的检测和便捷操作的软件降低对技术人员的要求,且自动进样器的功能有助于准确的结果和样品跟踪。
特点:
可提供多至3激光和13个荧光检测通道的多种不同仪器配置(用户可以升级配置,增加更多通道,包括更多的激光器或滤光片),如图所示;
可增添自动进样器模块,减少数据采集过程中的人工操作时间;
采用光学透镜与流动室技术最大程度地减少光损失,从而获得尽可能高的灵敏度,即便是一些弱荧光也能明显识别弱表达细胞群;
采用雪崩光电二极管检测器代替PMT,且低电子噪声有助于提高仪器的分辨率
(2)Navios 流式细胞仪
Navios 流式细胞仪拥有高级细胞分析应用与工作流解决方案,可满足高处理量的实验室。
特点:
拥有多达 12 个参数进行高复杂性检测;
与先进的光学设计结合提高灵敏度、信号分辨率以及质量;
可同时检测10色荧光,用户通过选择合适的单克隆抗体可轻松完成复杂细胞群的分析,同时可收集每份样本的额外数据点;
具有三种前向角散射光(FS)检测方式,不仅可以检测常规的白细胞,血小板等,最小可区分0.4μm的颗粒;
仪器内部温度可控制,保证样本运行时不受外界干扰,实现最准确的样本检测;
减少需准备的样本数量和可能的移液错误。
2、细胞分选仪
细胞分选仪拥有小巧、智能的优越特性,将分选化繁为简,使得分选更加轻松与准确,细胞分选仪有两款产品,包括CytoFLEX SRT和MoFlo Astrios EQ。
(1) CytoFLEX SRT
CytoFLEX SRT基于CytoFLEX的光学系统、全自动化的操作,能够与CytoFLEX 平台分析仪配合使用,带来高效的检测和分选体验。
特点:
其紫色-蓝色-黄绿色-红色(V-B-Y-R)系列最高配置仪器具有 15 个荧光检测器(所有配置均可升级);
支持复杂的分选逻辑,包括 4 路分选、混合模式分选以及捕捉丢弃细胞和保存宝贵细胞的能力;
设置智能、简化,自动建立和保持分选液流;
(2)MoFlo Astrios EQ
MoFlo Astrios EQ 系列细胞分选仪是一款六路分选系统,在降低分选任务复杂性的同时提供了强大的分选功能,且流路设计可长时间稳定运行。
特点:
7 个激光/7 针孔配置系统(355 nm、405 nm、488 nm、532 nm、560 nm、592 nm、645 nm);
使用多种采集装置的6路分选(所有分选输出均具有温度控制,可选水浴法);
采集率 > 100,000 个颗粒/每秒;
可同时检测44个参数。
参考文献:
[1]Becton, Dickinson and Company官网
[2] 资料来源:分析测试百科网
https://www.antpedia.com/news/58/n-2568158-p-5.html
[3] 资料来源:清华大学生物医学测试中心
[4] 资源来自Beckman Coulter官网
封面图来源:图片来自网络,侵删
作者声明:感谢本文参考资料作者,文中观点仅供参考,不恰当之处还望包涵指正,资料内容侵删。
作者:李芳 武瑾嵘
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发表于 2025-2-27 12:07
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可以了解一下牛顿光学的产品,高通量多视野,用过的都说好。我们实验室就在用一台,效果很好。性价比非常高,主要是可以免费试用。在微信公众号里面就能申请免费试用了。可以了解一下哦
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发表于 2025-2-27 12:07
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我们是用赛多利斯高通量流式细胞仪,通量很高,检测速度也很快。5 分钟内完成 96 孔板处理,在 20 分钟内完成 384 孔板处理。可对悬浮样本中的细胞、微球和分泌蛋白进行高内涵、多重分析。
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