细胞周期的流式检查实验———实验入门全解析

笑看风云

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细胞周期是细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束的全过程，它对细胞的生长、发育和疾病的发生都有着至关重要的作用。而流式细胞术（Flow Cytometry）则是研究细胞周期的强大工具，它能快速、准确地分析细胞周期的各个阶段，帮助我们揭开细胞生长的秘密。
一、实验重要性

在肿瘤研究中，细胞周期的异常变化更是关键。比如，柔红霉素这种抗肿瘤药物，就能通过阻断细胞周期来抑制肿瘤细胞的分裂。今天，我们就通过虚拟仿真实验，来探究柔红霉素对细胞周期的影响。

二、实验器材和试剂

1、实验器材

▶流式细胞仪
这是我们的“核心仪器”，能快速检测细胞的荧光信号和散射光信号。



（安捷伦流式细胞仪）

▶离心机、漩涡混匀仪、移液器
这些小帮手能帮我们分离和处理细胞。



（高速微型离心机）四亿



（标准混匀仪）四亿

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（单通道移液器）四亿

2、试剂耗材

▶细胞培养板、无菌离心管、巴氏吸管
重要性：这些工具能确保细胞在实验过程中保持最佳状态。



（12细胞培养板）



（15ml无菌离心管）



（一次性无菌巴氏吸管）



（1.5ml无菌离心管）



（木滤网）

▶试剂全家桶
重要性：包括柔红霉素、细胞培养液、PBS、DNA染色试剂等，这些试剂是实验的关键“调味料”。








三、实验步骤

1、细胞培养
在超净工作台内处理细胞，进行离心、重悬，并在37度二氧化碳培养箱中培养至对数生长期。
2、分组处理
将细胞分为对照组和实验组，分别加入细胞培养液和抗肿瘤药物柔红霉素，培养24小时。
3、细胞收集与固定
收集细胞，进行离心、洗涤，用75 %乙醇固定4小时以上。
4、DNA荧光染色
用PI DNA荧光染色试剂对细胞进行染色，室温避光孵育15分钟。
5、流式细胞仪检测
设置流式细胞仪参数，对细胞进行散射光和荧光检测，记录并保存实验结果。



四、实验结果分析

▶对照组
细胞周期分布正常，G1 期、S 期和 G2M 期细胞比例分别为 43.09%、21.87% 和 34.39%。
▶实验组
经柔红霉素处理后，G2M 期细胞比例大幅增加至 69.65%，表明细胞周期被阻断在 G2M 期，肿瘤细胞分裂受到抑制。


通过流式细胞仪检测，获得对照组和实验组的细胞散射光散点图、据粘连散点图和细胞周期直方图 。分析结果显示，与对照组相比，实验组G2/M期细胞占比大幅增加，表明经抗肿瘤药物柔红霉素处理后，细胞被阻断在G2/M期，抑制了肿瘤细胞的分裂。
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