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[讨论] 胶体金试纸使用全血和血清作为样本的敏感性是否一样,如果有差异,原因是什么呢?

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发表于 2025-1-29 20:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2025-1-29 20:30 | 显示全部楼层
市面上的呼吸道检测大多采用胶体金法,以上篇提到的呼吸道五项检测为例,其采用免疫捕获法原理检测肺炎支原体IgM抗体、肺炎衣原体IgM抗体、呼吸道合胞病毒IgM抗体、腺病毒IgM抗体、柯萨奇病毒抗体B组IgM抗体。
分别用鼠抗人IgM抗体单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被硝酸纤维素膜;胶体金分别标记肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、柯萨奇病毒B组(CoxB)重组抗原和鼠抗IgG抗体为示踪物包被玻璃纤维素膜载金垫。使用时加入待测血清或全血,如样本中含有肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、柯萨奇病毒B组(CoxB)IgM抗体时,则可以分别与胶体金标记的肺炎支原体、肺炎衣原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒B组抗原形成复合物,该复合物在包被的鼠抗人IgM抗体处捕获,与鼠抗人IgM抗体结合呈现紫红色条带,作为检测线(T)。胶体金标记的鼠抗IgG抗体与羊抗鼠IgG抗体结合呈现紫红色条带,作为质控线(C)。
主要组成成分
1.检测卡。检测卡由塑料板卡、硝酸纤维素膜、吸水纸和载金垫组成:内含肺炎支原体重组抗原(采用载体为 pET-30a)、肺炎衣原体重组抗原(采用载体为 pET28-a)、呼吸道合胞病毒重组抗原(采用载体为 pET-30a)、腺病毒重组抗原(采用载体为 pET28-a)、柯萨奇病毒 B 组重组抗原(采用载体为 pET28-a)、抗人 IgM 抗体、鼠IgG 抗体和羊抗鼠IgG 抗体。
2.样本稀释液:20mmol/L PBS 缓冲液,2瓶/4瓶 x6mL
3.干燥剂。
样本要求
1. 按常规方法采集血清或全血样本。
2.在采集、保存过程中应注意无菌操作。全血样本应及时将血液颠倒摆匀,使血液与抗凝剂充分混合。
3.全血标本可采用常规用量的肝素、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸抗凝。
* 全血样本不可冻存。血清样术不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低。
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发表于 2025-1-29 20:30 | 显示全部楼层
对于胶体金试纸的话,最大的优点就是快速,方便,不需要特别专业的操作,可以用于医院、疾控的快筛快查,个人的自检自测。
如果是个人自测的话,胶体金试纸采全血样本(指尖血或静脉血)检测即可,个人获取血清样本还是有一定难度的。现在的胶体金试纸普遍都有一些内部质控和提高可靠性的技术,使用全血样本和血清/血浆样本在准确性和敏感性方面,实际并没有什么区别。



胶体金试纸结构原理

但在一些特定的情况下,检测某一些特殊样本时,比如高溶血,高血脂,高胆红素样本,含类风湿因子的样本,黄疸样本,这时全血样本在特异性方面(特异性越高,假阳性的几率就越低,特异性达到100%就表示不会出现假阳性),确实全血样本比血清样本稍差一点。
所以,如果胶体金试纸出现“阳性”的情况,这并不代表一定感染了什么传染病,还需要通过进一步的检测才能排除/确诊感染。
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发表于 2025-1-29 20:30 | 显示全部楼层
如果非要分个高下,那么肯定是用血清/血浆测的敏感性>静脉全血>指尖血。
为什么呢?
我们的血液是由血浆和血细胞组成的,血浆主要由水、电解质、蛋白质等有机化合物组成。血浆中的多种蛋白质统称血浆蛋白,主要包括白蛋白、球蛋白和纤维蛋白。而抗体是由机体的免疫系统在抗原刺激下产生的,可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白,它的化学本质是球蛋白



图片来源于网络

而血清和血浆的区别是,血清在凝血过程中消耗了纤维蛋白原和一些凝血因子,但是球蛋白并不受影响,所以血清和血浆测抗体的敏感度都是一样的。
因此血清/血浆中的抗体浓度>静脉全血中的抗体浓度。而指尖血由于我们在操作过程中由于采血不规范以及挤压等,会让血液中混入更多的组织液,所以指尖血的抗体浓度<静脉全血。
因此结论就是血清/血浆测的敏感性>静脉全血>指尖血。不过由于我们的试剂现在的检测线都设的很低,理论上的抗体浓度高低在我们的检测试纸上的最低检测限都是能将他们检测出来的,所以用什么标本具体没有多少意义。
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发表于 2025-1-29 20:31 | 显示全部楼层
理论上来说全血和血清都可以用,因为试纸里有一层滤纸,可以过滤掉有形成分(就是血细胞),正常的全血血清做出来该阳性还阳性,不会有差别,而且胶体金试纸条是一个定性的方法,只有阴性,弱阳性,阳性三种情况。唯一需要注意的就是如果红细胞过多(比如真红细胞增多症)有可能会阻挡滤纸,导致液体没法在胶体金试纸条中前进,试验失败。这时候就还是推荐使用血清为好。
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发表于 2025-1-29 20:31 | 显示全部楼层
全血含有血细胞抗原抗体的浓度相对较低,血清血浆由于没有血细胞抗原抗体浓度高,如感染更容易检测出来。

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