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市面上的呼吸道检测大多采用胶体金法,以上篇提到的呼吸道五项检测为例,其采用免疫捕获法原理检测肺炎支原体IgM抗体、肺炎衣原体IgM抗体、呼吸道合胞病毒IgM抗体、腺病毒IgM抗体、柯萨奇病毒抗体B组IgM抗体。
分别用鼠抗人IgM抗体单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被硝酸纤维素膜;胶体金分别标记肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、柯萨奇病毒B组(CoxB)重组抗原和鼠抗IgG抗体为示踪物包被玻璃纤维素膜载金垫。使用时加入待测血清或全血,如样本中含有肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、柯萨奇病毒B组(CoxB)IgM抗体时,则可以分别与胶体金标记的肺炎支原体、肺炎衣原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒B组抗原形成复合物,该复合物在包被的鼠抗人IgM抗体处捕获,与鼠抗人IgM抗体结合呈现紫红色条带,作为检测线(T)。胶体金标记的鼠抗IgG抗体与羊抗鼠IgG抗体结合呈现紫红色条带,作为质控线(C)。
主要组成成分
1.检测卡。检测卡由塑料板卡、硝酸纤维素膜、吸水纸和载金垫组成:内含肺炎支原体重组抗原(采用载体为 pET-30a)、肺炎衣原体重组抗原(采用载体为 pET28-a)、呼吸道合胞病毒重组抗原(采用载体为 pET-30a)、腺病毒重组抗原(采用载体为 pET28-a)、柯萨奇病毒 B 组重组抗原(采用载体为 pET28-a)、抗人 IgM 抗体、鼠IgG 抗体和羊抗鼠IgG 抗体。
2.样本稀释液:20mmol/L PBS 缓冲液,2瓶/4瓶 x6mL
3.干燥剂。
样本要求
1. 按常规方法采集血清或全血样本。
2.在采集、保存过程中应注意无菌操作。全血样本应及时将血液颠倒摆匀,使血液与抗凝剂充分混合。
3.全血标本可采用常规用量的肝素、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸抗凝。
* 全血样本不可冻存。血清样术不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低。 |
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