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[分享] pcr跑成这样是什么原因?

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发表于 2025-1-26 09:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2025-1-26 09:41 | 显示全部楼层
这种情况一般有两种可能的原因,一种是模板浓度太高,一种是引物特异性不好。
一般情况下,PCR反应的模板浓度是比较低的,以质粒当模板,质粒一般只需要几纳克就够了,以基因组DNA当模板,基因组DNA也只需要100-200 ng就够了,模板浓度太高会降低DNA聚合酶的效率,影响引物的特异性。
如果引物特异性不好,又不能更换引物的话,建议适当提高退火温度。如果是以基因组DNA或cDNA作为模板扩增的话可以加点甜菜碱或DMSO试试。
祝实验顺利
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