过去,维生素D的测定主要采用竞争结合法、高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫法(ELISA)。 实验室常用的就是ELISA试剂盒,这被认为是金标准,但是实际上检测的是25-羟基维生素D。25-羟基维生素D检测是一个两步程序,包括从血清或血浆中快速提取25-羟基维生素D和其他羟基化代谢物,然后使用具有25-羟基维生素D特异性的抗体进行竞争性RIA检测。
为啥不直接检测维生素D呢?因为维生素D很不稳定。25-羟基维生素D是血液中维生素 D 的主要循环形式,稳定性好,是公认的评价人体维生素 D 营养状况的可靠指标,主要包括两种形式:25(OH)D2、25(OH)D3,其中 25(OH)D3是血液中维生素 D 的主要存在形式。因此当人体血清(或血浆)25-羟基维生素 D 含量低于缺乏的参考判定值时,可判定为维生素 D 缺乏。
参考文献:
Wendy L Arneson, Dean L Arneson, Current Methods for Routine Clinical Laboratory Testing of Vitamin D Levels,Laboratory Medicine, Volume 44, Issue 1, February 2013, Pages e38–e42, 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准:人群维生素 D 缺乏筛查方法