医学检验 检验师 微生物检验技术 必考知识点

虎威将军

第二章　细菌的形态结构与功能
细菌的大小
　　测量单位：
微米（μm）1μm＝1/1000mm
细菌的结构
原核生物界的一种单细胞微生物。具有细胞壁和原始核质，无核仁核膜；除核糖体外无其他细胞器。
细胞壁

革兰阳性菌	革兰阴性菌	与细胞壁关系
肽聚糖层数	可多达50层	1～2层	坚韧疏松不同
革兰染色	紫色	红色	对酒精通透性
抗原性	磷壁酸	外膜	组成不同
毒性	无内毒素	有内毒素	阴性菌细胞壁有脂多糖
青霉素药效	好	差	青霉素破坏肽聚糖五肽交联桥

细胞壁缺陷型细菌（细菌L型）
　　·形成条件：溶菌酶、青霉素、抗体、胆汁等作用
　　·特点：肽聚糖结构受损
　　·生物学特性：
　　·多形性、革兰染色多阴性
·需要特殊培养基（高渗培养基）
　　·致病性：仍有一定致病性
细胞膜
　　（1）细胞膜的结构与功能
　　（2）中介体
　　细胞膜：
　　细胞壁内侧紧包细胞质的脂质双层（脂质、蛋白质、多糖）G-菌细胞膜也称内膜。
　　中介体：
又称中间体，是细胞膜内陷折叠而成的管状、囊状结构。其功能类似真核细胞的线粒体，也参与细菌分裂。
细胞质
　　（1）细胞质的结构与功能
　　（2）内含物
　　（3）核糖体
　　（4）质粒
细胞质是蛋白质和酶类合成的重要场所。
　　性质：细胞膜包裹着的物质。
　　基本成分：水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐。
　　功能：含丰富的酶系统，参与营养物质的合成与分解。
核糖体：蛋白质合成场所
质粒
内含物：贮存营养物质
质粒
·双链闭环DNA分子
·核质以外的遗传物质，控制细菌某些特定的遗传性状
·非细菌生命活动所必需
F质粒：制造性菌毛。
R质粒：决定细菌耐药性形成。
Vi质粒：参与细菌毒力。
Col质粒：决定大肠杆菌能否产生大肠菌素。
核质
　　（1）核质的结构与组成
　　（2）核质的功能
　　核质
　　形态：一条细长的闭环双链DNA反复盘绕卷曲而成。
　　功能：决定细菌性状和遗传特征，故它是细菌遗传变异的物质基础，是细菌的主要遗传物质。
第三章　细菌的生理
细菌的生长繁殖规律
繁殖方式
个体：二分裂。
　生长曲线分为4个时期：
1）迟缓期：是细菌进入新环境后的适应阶段，细菌数不增加，甚至还稍有减少。
2）对数期：此期细菌以几何级数增长（20→21→22→23→24→…），在生长曲线图上，活菌数的对数呈直线上升，增长极快。此期细菌的形态、染色性、生理活性都较典型，对外界环境因素的作用较为敏感。
3）稳定期：由于培养基中营养物质消耗，毒性产物积聚，pH下降使细菌繁殖速度渐趋下降，细菌死亡数则逐渐上升，细菌繁殖数与死亡数大致平衡。
4）衰亡期：细菌繁殖逐渐减慢，死亡逐渐增多，死菌数超过活菌数。
S-R变异：菌落变异，细菌的分类等级（分类单位）和其他生物相同，为界、门、纲、目、科、属、种。临床细菌检验常用的分类单位是科、属、种。种是细菌分类的基本单位。
如肠热症患者，发病的第1周应采集血液，第2周应采集粪便和尿液，否则影响细菌检出率。
细菌染色标本的检查
观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构、异染颗粒等。
革兰染色法：革兰阳性/阴性细菌
抗酸染色法：结核抗酸杆菌
墨汁染色法：新型隐球菌
细菌染色的基本程序：
涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染）
结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红
异染颗粒染色：白喉棒状杆菌感染检测。
第十章　细菌的生物化学试验
　细菌分离培养和鉴定-生化反应与鉴定

碳水化合物代谢试验	蛋白质和氨基酸代谢试验	碳源和氮源利用试验	各种酶类试验	抑菌试验
糖类发酵试验	明胶液化试验	枸橼酸盐利用试验	氧化酶试验	O/129抑菌试验
氧化-发酵试验	吲哚（靛基质）试验	丙二酸盐利用试验	过氧化氢酶试验（触酶试验）	杆菌肽试验
β-半乳糖苷酶试验	硫化氢试验	硝酸盐还原试验	奥普托欣试验
七叶苷水解试验	尿素分解试验	脂酶试验
甲基红试验	苯丙氨酸脱氨酶试验	卵磷脂酶试验
V-P试验	氨基酸脱羧酶试验	DNA酶试验
凝固酶试验
CAMP试验
胆汁溶菌试验

第十三章　病原性球菌及检验

革兰染色	形态排列	特殊结构	菌落	抵抗力
葡萄球菌	G+	球形   葡萄状	无荚膜 ，无芽胞，鞭毛（略）	最强，耐热，耐干燥，耐高盐
链球菌	G+	球形   链状	似针尖样
肠球菌	G+	卵圆形成双或短链	部分有鞭毛，无芽胞，无荚膜	圆形光滑灰白色能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上生长。
奈瑟菌	G-	肾形   成对	无鞭毛，无芽胞，有菌毛，新分离的菌株有荚膜	常用血琼脂平板、巧克力琼脂或EPV琼脂，初次分离需置5%～10%C02环境中，35℃培养（露珠状）。
卡他布兰汉菌	G-	球形   成对	无芽胞和鞭毛。	菌落易从培养基上刮下。

生化试验
葡萄球菌	触酶试验阳性（总）。金葡分解甘露醇产酸，凝固酶阳性，DNA酶阳性，新生霉素敏感。 表葡凝固酶阴性，对新生霉素敏感。腐生两者都不敏感。
链球菌	触酶试验阴性（与葡萄球菌区分）特殊试验在下文叙述
肠球菌	触酶试验阴性，能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上生长。多数肠球菌能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR）。
奈瑟菌	触酶试验阳性，氧化酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。
卡他布兰汉菌	氧化酶阳性，仅发酵葡萄糖而不发酵麦芽糖和蔗糖以及30％过氧化氢阳性（与脑膜炎奈瑟球菌区分   ）

葡萄球菌——分类
金黄色葡萄球菌：金黄色。
表皮葡萄球菌：白色。
腐生葡萄球菌：柠檬色。
是抵抗力最强的无芽胞细菌。（耐高温，干燥，盐）
链球菌——分类
生化试验（鉴定）

杆菌肽敏感试验	CAMP试验	胆汁七叶苷试验	奥普托欣试验	胆汁溶菌	马尿酸盐水解试验
A群链球菌	+
B群链球菌	+	+
D群链球菌	可生长
肺炎链球菌	敏感

肺炎链球菌——生物学特性
　　形态与结构
　　形态：革兰阳性球菌。
  排列：矛尖状，钝面成双排列，有时呈短链状。
　　染色：G+。
　　特殊结构：有荚膜，无鞭毛，无芽胞。
培养特性
　　菌落特征：在肉汤及琼脂培养基上生长不良，在含3%～5%兔或羊血清肉汤中生长良好。在血琼脂平板上可形成灰色扁平、中心凹陷直径为0.5～1.0mm的菌落（脐窝状），周围有草绿色溶血圈。
脑膜炎奈瑟菌——微生物检验及鉴定
　　标本采集：血液、脑脊液、鼻咽分泌物等。因本菌能产生自溶酶，易自溶，故采集的标本不宜置冰箱，应立即送检。
　　形态学检查：脑脊液中性粒细胞内（或胞外）革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列

糖类发酵试验	触酶试验	氧化酶试验	硝酸盐还原试验和DNA酶
分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气	+	+	-

脑膜炎奈瑟球菌麦芽糖发酵试验阳性，淋病为阴性。
卡他布兰汉菌——微生物检验及鉴定
　　生化试验（鉴定）

触酶试验	氧化酶试验	硝酸盐还原试验	DNA酶试验
+	+	+	+

第十四章　肠杆菌科及检验
概述和通性——生物学特性
　　形态：G-杆菌。
　　特殊结构：
　　多数有周鞭毛，能运动。
志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛。
均不形成芽胞，少数菌属（埃希菌属和克雷伯菌属）可形成荚膜。

糖类发酵试验	触酶试验	氧化酶试验	硝酸盐还原试验
分解葡萄糖产酸或产酸产气	+	-	+

特殊结构	培养情况
埃希菌属	有周鞭毛，荚膜	伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。   麦康凯和SS琼脂上，胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。
志贺菌属	无鞭毛	普通琼脂平板和SS培养基上培养形成中等大小、半透明光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙菌落
沙门菌属	有周鞭	SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上可形成透明或半透明菌落，对胆盐耐受。   　　产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落。
变形杆菌	有周鞭毛,	营养琼脂或血琼脂平板大多呈迁徙扩散生长。（苯酚、硼酸、胆盐可抑制）。含有胆盐的培养基：菌落扁平、圆形、半透明。   肠道菌选择培养基上形成不发酵乳糖菌落。   SS培养基：常形成黑色中心菌落
鼠疫耶尔森菌	有荚膜   无鞭毛芽胞	底部絮状沉淀呈“钟乳石”状   3%NaCl琼脂培养基上呈明显多形性
假结核耶尔森菌	25℃培养有周鞭毛，有动力，37℃培养无动力	普通营养琼脂：37℃24h形成圆形，中心凸起，颗粒状，灰黄色，半透明的菌落   SS琼脂上不生长，含胆盐培养基或麦康凯培养基上生长   液体培养基：均匀浑浊生长者为光滑型菌株，沉淀生长为粗糙型菌株
小肠结肠炎耶尔森菌	25℃培养形成周鞭毛，呈翻滚旋转状运动；37℃培养无动力，无芽胞，无荚膜	麦康凯培养基：不发酵乳糖的无色、透明或半透明、扁平较小的菌落。SS琼脂上生长不良
肠杆菌属	有周鞭毛   部分有荚膜	普通琼脂：形成大而湿润的黏液状菌落。（会动的克雷伯）   肠道菌选择培养基：多数形成乳糖发酵菌落。
克雷伯菌	有荚膜   无鞭毛芽胞	血琼脂上形成大圆形凸起，灰白色，不溶血的菌落。有时菌落呈现黏液型，用接种环挑取时呈长丝状。   肠道菌选择培养基中为乳糖产酸菌落
沙雷菌属	有周鞭毛   部分有荚膜	在4%氯化钠条件下可生长。   普通营养琼脂呈白色、红色或粉红色菌落。   产生两种色素：灵菌红素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性），菌红素   体积最小

KIA培养基	MIU培养基	IMViC试验
埃希菌属	葡萄糖、乳糖+   产酸产气，H2S-	++-	++--
志贺菌属	葡萄糖+，乳糖-   产酸不产气,H2S-	---	-+--
沙门菌属	葡萄糖+,乳糖-，   产酸产气，H2S+	+--	-+-+
肺炎克雷伯菌	大多发酵乳糖	--+	--++
肠杆菌属	大多发酵乳糖	--++

　肠道感染

病原群	临床表现
肠产毒性大肠埃希菌ETEC	霍乱样肠毒素腹泻（水泻）
肠致病性大肠埃希菌EPEC	婴儿腹泻
肠侵袭性大肠埃希菌EIEC	痢疾样腹泻（黏液脓血便）
肠出血性大肠埃希菌EHEC   又称   产志贺样毒素大肠埃希氏菌   （SLTEC或UTEC）	O157:H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）：严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等；严重者可发展为急性肾衰竭
肠黏附性大肠埃希菌EAggEC	腹泻

血清分型：

A群痢疾志贺菌	甘露醇发酵试验阴性，10个血清型
B群福氏志贺菌	6个血清型和X、Y2个变种
C群鲍特志贺菌	15个血清型
D群宋内志贺菌	迟缓发酵糖类；仅有一个血清型有光滑型和粗糙型两种菌落

沙门菌属:  诊断伤寒：O凝集效价≥1:80，H凝集效价≥1:160。
变形杆菌属细菌具O抗原及H抗原。
外-斐（Weil-Felix）反应：普通变形杆菌的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是用以诊断某些立克次体病的依据。
沙雷菌属——微生物检验及鉴定
　　生化反应 关键反应：DNA酶和葡萄糖酸盐试验

糖类发酵试验	β-半乳糖苷酶试验	葡萄糖酸盐试验	明胶液化试验	DNA酶试	脂酶试验	枸橼酸盐试验
发酵多种糖	+	+	+	+	+	+

第十五章　弧菌科及检验
弧菌科室一群氧化酶阳性，具有极端鞭毛，动力阳性，发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
霍乱弧菌——生物学特性
形态与结构
形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。人工培养后呈杆状
特殊结构：部分有荚膜。无芽胞，一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。
培养特性
　　营养要求：不高，可无盐生长。
　　菌落特征：耐碱不耐酸。
pH8.5的碱性蛋白胨水：培养6～9h，增菌形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
　　硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。
生化反应

糖类发酵试验	氧化酶试验	硝酸盐还原试验	ONPG试验	明胶液化试验	吲哚试验	动力试验	霍乱红反应
分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖   产酸不产气	+	+	+	+	+	+	+

对0/129敏感
副溶血弧菌——生物学特性
　形态：多形性。
　　染色：G-；两极浓染。
　　特殊结构：一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜
　培养特性
　　营养要求：不高；嗜盐性弧菌。
　　气体环境：需氧
　菌落特征：
35g/LNaCl琼脂平板：蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起光滑湿润不透明。
　　副溶血性弧菌专用选择培养基：形成稍隆起浑浊无黏性绿色菌落。
TCBS琼脂：不发酵蔗糖，菌落绿色。
副溶血弧菌——微生物检验及鉴定
　　分离培养：在70g/LNaCl培养基中生长，无盐培养基中不生长。在100g/LNaCl培养基中不生长，其最适浓度是35g/l
40g/LNaCl蛋白胨水中，培养增菌。
　　接种副溶血弧菌选择培养基，培养18～24h。菌落湿润、浑浊无黏性，呈绿色。
生化反应

糖类发酵试验	硫化氢试验	氧化酶试验	甲基红试验	V-P试验	动力试验	吲哚试验	尿素酶试验	神奈川试验
分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉、阿拉伯糖；不分解乳糖、蔗糖，产酸不产气	-	+	+	-	+	+	-	+

创伤弧菌，引起的疾病最为严重，溶藻弧菌是耐盐性最强的致病菌。
气单胞菌属——生物学特性
单极鞭毛，运动极为活泼（除杀鬼气单胞菌外）。无芽胞，有窄的荚膜。
营养要求：不高；生长不需要NaCl。
　　气体环境：兼性厌氧。
　肠道选择培养基：大多数形成乳糖不发酵菌落，TCBS琼脂上生长不良。
气单胞菌属——微生物检验及鉴定
　　生化反应

糖类发酵试验	硝酸盐还原试验	氧化酶试验	触酶试验	动力试验	尿素酶试验
发酵葡萄糖，产酸或产酸产气	+	+	+	+	-

　邻单胞菌属
　　生长不需要NaCl。
　　只有一个种即类志贺邻单胞菌，0/129敏感（气单胞不敏感）
第十六章　弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
　弯曲菌属
弯曲菌属——生物学特性
　　形态与结构
形态：细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。
　　染色：G-。
　　特殊结构：有单鞭毛，运动活泼，投镖式或螺旋状运动。两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽胞，无荚膜。
　培养特性
　　营养要求：高；需加入血液、血清才能生长。
　　气体环境：微需氧；初次分离需在含5%O2、85%N2、10%CO2中生长
　　温度环境：空肠弯曲菌在43℃生长，25℃不生长。
胎儿弯曲菌在25℃生长，43℃不生长。
37℃都能生长。
生化反应

氧化酶试验	硝酸盐还原试验	触酶试验	动力试验	尿素试验	马尿酸水解试验
+	+	+	+	-
空肠弯曲菌	+

幽门螺杆菌——生物学特性
染色：G-。
　　特殊结构：
一端或两端可有多根带鞘鞭毛。
　　运动活泼。
培养特性
　　营养要求：较高；需加入血液、血清才能生长。
　　气体环境：微需氧。
　　温度环境：37℃能够生长，25℃不生长、42℃少数生长。
生化反应

氧化酶试验	触酶试验	快速脲酶试验（快速诊断）
+	+	+

第十七章　厌氧性细菌及检验
厌氧状态的指示
1.化学法：亚甲蓝和刃天青。
无氧时均呈白色，有氧时亚甲蓝呈蓝色，刃天青呈粉红色。
2.微生物法：专性需氧菌。
破伤风杆菌——生物学特性
呈鼓槌状, 染色：G+；培养48h后，尤其芽胞形成后易转变为G-。特殊结构：有周鞭毛，无荚膜；芽胞在菌体顶端，呈圆形。疱肉培养基：肉渣部分消化，微变黑。
（3）生化试验：

糖类发酵试验	H2S试验	明胶液化试验	硝酸盐还原试验	吲哚试验
-	+	+	-	+

产气荚膜梭菌
无鞭毛；在机体内可形成明显的荚膜。
　　芽胞呈椭圆形，数菌株有双层溶血环。疱肉培养基：可分解肉渣中的糖类而产生大量气体。
　　牛乳培养基：能分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，出现“汹涌发酵”现象。
产气荚膜梭菌——微生物检验及鉴定
　生化试验：

糖类发酵试验	H2S试验	明胶液化试验	卵磷脂酶试验
分解多种糖类，产酸产气	+	+	+

肉毒梭菌
形态：短粗；呈汤匙状或网球拍状。特殊结构：
　　有周鞭毛，无荚膜。
　　芽胞呈椭圆形，粗于菌体，位于次极端。　　血平板：β溶血。
疱肉培养基：消化肉渣使之变黑，有腐败恶臭。
　肉毒梭菌——微生物检验及鉴定
　　（3）生化试验：

糖类发酵试验	H2S试验	明胶液化试验	脂酶试验	吲哚试验
分解葡萄糖麦芽糖	+	+	+	-

　致病物质
肉毒毒素：毒性强（毒性最强的细菌毒素），导致肌肉麻痹。
艰难梭菌——生物学特性
生化试验

糖类发酵试验	H2S试验	卵磷脂酶试验	脂酶试验	吲哚试验
分解葡萄糖果糖	-	-	-	-

伪膜性肠炎：重症患者水样便中可出现斑片状假膜
第十八章　需氧/兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
第十八章　需氧/兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验

形态结构及培养要求	菌落特征	培养要求	鉴别要点	临床意义
白喉棒状杆菌	形态：细长微弯，一端或两端膨大。   排列：散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。   特殊结构：无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。革兰染色：阳性。	吕氏血清斜面生长迅速，异染颗粒明显。S型菌落。普通培养基生长不良。   亚碲酸钾血琼脂菌落黑色   亚甲蓝染色：深浅相间节段或着色较深的颗粒。   　　Neisser染色：菌体染成黄褐色，颗粒染成紫黑色。   　　Albert染色：菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。	营养要求：较高。   气体环境：需氧或兼性厌氧。   温度环境：35～37℃；pH7.2～7.8。	不分解乳糖；产酸不产气。毒力试验，异染颗粒	白喉外毒素致白喉；菌体不入血，可有毒血症
炭疽芽胞杆菌	形态：两端齐平，呈竹节状。   排列：组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链。   大小：致病菌中最大的革兰阳性杆菌。   无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。   人工培养或在外界环境中易产生芽胞（位于菌体中央）	（血）琼脂平板：形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，低倍镜下观察呈卷发状。   　酸氢钠琼脂平板：置5%CO2环境中37℃24h后，有毒株形成黏稠有光泽的黏液型（M型）菌落（有荚膜菌体）；无毒株粗糙型菌落（R型）。	营养要求：一般。   气体环境：需氧或兼性厌氧。   温度环境：37℃，pH7.0～7.4。	不分解乳糖；产酸不产气。串珠试验阳性；重碳酸盐毒力试验菌落M型，噬菌体裂解试验。	荚膜及炭疽毒素致炭疽病
产单核李斯特菌	形态：偶呈丝状。   排列：呈V字形或成对排列。幼龄菌G+，陈旧培养物G-；有鞭毛；无芽胞，20℃有动力。无荚膜	血琼脂小而透明S型菌落，狭窄β溶血环。半固体培养基25℃倒伞形生长	营养要求：一般。   气体环境：需氧或兼性厌氧。   温度环境：能生长于4℃。（可进行冷增菌）	不发酵甘露醇和木糖   触酶及七叶苷水解试验阳性；CAMP试验阳性	胎盘或产道感染新生儿   传单
红斑丹毒丝菌	G+杆菌，单个存在或形成短链。   无芽胞、无鞭毛、无荚膜。	血琼脂光滑型、粗糙型菌落	厌氧或微需氧，   初次分离要厌氧	发酵葡萄糖、乳糖，产酸不产气   触酶，氧化酶，动力阴性，H2S阳性	丹毒丝菌病
阴道加特纳菌	多形性；新鲜G+，菌株G-。·无芽胞、无荚膜、无鞭毛	人血平板有针尖菌落，β溶血环	营养要求较高	非淋菌性阴道炎
蜡样芽胞杆菌	G+大杆菌，芽胞位于菌体中心或次末端不突出菌体。，引起食物中毒的是周毛菌，有动力不形成芽胞呈链状排列。	菌落较大，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，血平板上有b溶血	营养要求不高	表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，能耐受100度30min，干热120度60min	食物中毒

第十九章　分枝杆菌属及检验
结核分枝杆菌——生物学特性
染色：G+。抗酸染色红色。金胺“O”染色菌体可发荧光。生长缓慢，最快的分裂速度为18h一代。
固体培养基（罗氏培养基）：需2～6周才能长出菌落。菌落呈干燥颗粒状，不透明，乳白色或米黄色，表面呈皱纹状，形似菜花。
Koch现象：结核的特异性免疫是通过结核分枝杆菌感染后所产生，称为Koch现象。
麻风分枝杆菌——生物学特性
特殊：
典型的胞内寄生菌，该菌所在细胞胞质呈泡沫状，称麻风细胞。
第二十章　不发酵菌及检验
不发酵菌概述
不发酵或仅氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性无芽胞杆菌；大部分为专性需氧菌。大多为条件致病菌。 除不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌及个别假单胞菌外，氧化酶试验均为阳性。
假单胞菌属
假单胞菌属
　　铜绿假单胞菌——生物学特性
　　形态与结构
　　染色：G-。
　　特殊结构：无芽胞，无荚膜。有1～3根鞭毛，运动活泼。
培养特性
气体环境：专性需氧。
　　温度环境：最适35℃，4℃不生长。
　菌落特点：
　普通琼脂平板：圆形大小不一，边缘不整齐、扁平、隆起、光滑湿润且常呈融合状态的菌落。
血液琼脂平板：扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落，有金属光泽；周围有透明溶血环。
　选择培养基：（麦康凯琼脂培养基）微小无光泽半透明菌落，48h菌落中心常呈棕绿色。（SS琼脂培养基）类似沙门菌的菌落，稍久菌落可呈棕绿色。
化试验（鉴定）

糖类发酵试验	氧化酶试验	触酶试验	硝酸盐还原试验	明胶液化试验	尿素水解试验	吲哚试验	枸橼酸盐利用试验	硫化氢试验
分解葡萄糖、木糖，产酸不产气	+	+	+	+	+	-	+	-

嗜麦芽窄食单胞菌
菌落不溶血，有黄色素。
　　氧化酶阴性，葡萄糖缓慢氧化，可水解七叶苷、液化明胶、DNA酶阳性并可使赖氨酸脱羧。
不动杆菌属
　　球杆状，并成对排列，可单个存在。
　　无芽胞、无鞭毛。
专性需氧菌。
“三阴”：即氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阴性和动力阴性。


军团菌属
　培养特性
营养要求：苛刻。
　　气体环境：专性需氧。
　　在含有2.5%～5% CO2环境中生长良好。
　　温度环境：最适36℃。
菌落特点：初次分离需L-半胱氨酸，培养基中含铁盐可促进生长。
活性炭-酵母浸出液琼脂（BCYE）培养基：培养3～5d形成圆形，凸起、灰白色、有光泽的菌落。
生化试验（鉴定）

糖类发酵试验	氧化酶试验	触酶试验
不分解糖类	部分+	+

第二十一章　其他革兰阴性杆菌及检验（小细菌）
嗜血杆菌属
　　·G-小杆菌，呈球杆状，有时呈杆状、长丝状等多形态。
　　·无动力、无芽胞。
染色：G-，着色较浅。苯酚复红或亚甲蓝单染色，呈现两端浓染现象
流感嗜血杆菌——生物学特性
普通培养基中须加入X和V因子。
加热血平板（巧克力平板）：18～24h后圆形、光滑湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。
在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小，此称为卫星现象，这有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。
1.副流感嗜血杆菌: 只需要V因子而不需要X因子。2.杜克嗜血杆菌：生长需要X因子，不需要V因子。可引起软性下疳。.溶血嗜血杆菌：生长需X因子和V因子。
鲍特菌属: 常用鲍-金培养基进行分离培养, ·百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌。
布鲁菌属: 能利用葡萄糖等糖类，尿素酶阳性，硝酸盐还原试验阳性。人畜共患，引起布鲁菌病，主要表现为菌血症。通过皮肤、呼吸道和消化道感染，首先侵犯局部淋巴结，之后入血，再进入各脏器，患者热型呈波浪热。
第二十二章　衣原体及检验
衣原体的概念、分类和命名
一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。
生物学性状:
发育繁殖周期与形态染色
（1）原体：吉姆萨染色呈紫色，Macchiavetllo染色呈红色。无繁殖能力，但有高度的感染性。
（2）网状体又称始体：吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为发育周期中的繁殖型，不能在胞外存活，无感染性。
（3）包涵体：在易感细胞胞浆内含增殖的始体和子代原体的空泡。吉姆萨染色深紫色。碘液染色深褐色。
第二十三章　立克次体及检验
概述
　　·一类微小的原核细胞型微生物，有DNA和RNA。
　　·大多是人畜共患病原体，引起人类发热和出血性疾病。
　　·以节肢动物为传播媒介或储存宿主。
　　·大小介于一般细菌与病毒之间。
　　·G-，呈多形性，主要为球杆状。
　　·除极少数外均专性活细胞内寄生。
　　·对多种抗生素敏感。
生物学特性
外斐反应：斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些菌体抗原（OX19、OX2、OXK抗原）具有共同的耐热性多糖类属抗原
·培养特性：除巴通体外，其他立克次体只能在活的真核细胞内生长。立克次体的分离繁殖常用方法有鸡胚卵黄囊培养、细胞培养。接种豚鼠等动物可用于立克次体的初代分离。
汉赛巴通体接种新鲜巧克力平板，在35℃、5%CO2环境中培养2周左右才出菌落。
·立克次体病
·普氏立克次体→流行性斑疹伤寒（又称虱传斑疹伤寒）
莫氏立克次体→地方性斑疹伤寒（又称鼠型斑疹伤寒）
·恙虫病立克次体→恙虫病
·贝纳柯克斯体（又称Q热立克次体）→Q热是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物
第二十四章　支原体及检验
支原体是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。
菌落特征与细菌L型菌落极相似，37℃培养3～10d菌落呈“荷包蛋”样。两者不同点在于细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下易返祖为原菌，而支原体不出现返祖现象。
葡萄糖：肺炎，生殖道支原体。人型支原体：精氨酸 解脲脲原体：分解尿素
第二十五章　病原性放线菌及检验
放线菌属——生物学特性
　　形态与结构
　　形态：分枝状无隔菌丝，但不形成空中菌丝。
　　有时断裂成短杆状或球状。
　　染色：G+；抗酸染色阴性。
　　特殊结构：无芽胞、荚膜和鞭毛。
线菌属——微生物检验及鉴定
　　　　形态学检查：
在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称为“硫磺颗粒”，是放线菌在病灶组织中形成的菌落。镜检可见颗粒呈菊花状，中央为革兰阳性的丝状体，周围为粗大的革 兰阴性棒状菌鞘，呈放射状排列。
诺卡菌属——生物学特性
　　形态与结构
　　形态：与放线菌相似，但菌丝末端不膨大。
　　培养早期裂解为较多的球状或杆状，分枝状菌丝较少。
　　染色：G+；抗酸染色弱抗酸性。
培养特性
　　气体环境：专性需氧。
　　菌落特点：
普通培养基或沙保培养基、脑心浸液琼脂：25～37℃培养均可生长，5～7d可见菌落表面干燥、有皱褶或呈颗粒状，不同种类可产生不同色素（黄、橙或红色等）。
分离培养
第二十六章　螺旋体及检验
（一） 伯氏疏螺旋体：莱姆病的病原体。主要传播媒介是硬蜱
（二） 回归热螺旋体: 回归热, 回归热螺旋体，以虱为传播媒介，引起流行性回归热；赫姆疏螺旋体，以蜱为传播媒介，引起地方性回归热。
钩端螺旋体: Fontana镀银染色法染成深褐色。钩体病是一种典型的人、畜共患性疾病及自然疫源性疾病。
密螺旋体属: 梅毒螺旋体不能在人工培养基上生长繁殖。一期梅毒取硬下疳渗出液，二期梅毒取梅毒疹渗出液。

病原体	特征	所致疾病	传播途径
①沙眼衣原体   ②鹦鹉热衣原体   ③肺炎衣原体	·能通过细菌滤器   ·细胞内专性寄生   ·有独特发育周期   ·细胞壁缺乏肽聚糖	①沙眼、泌尿生殖道感染   ②非典型肺炎   ③呼吸道感染	①接触传播   ②人禽共患空气传播   ③空气传播
①斑疹伤寒立克次体   ②恙虫病立克次体   ③贝纳柯克斯体   ④埃立克体   ⑤汉赛巴通体	·大多专性细胞内寄生   ·对多种抗生素敏感   ·G-，不易着色；吉姆萨染色、Macchiavello染色、Gimenez染色	①地方性斑疹伤寒   ②恙虫病   ③Q热   ④埃立克体病   ⑤人类杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫爪病	①啮齿类动物储存宿主，传播媒介鼠蚤或鼠虱   ②恙螨幼虫叮咬   ③不借助于节肢动物传播
①放线菌属   ②诺卡菌属	·分枝状生长G+杆菌   ·抗酸染色阴性或弱阳性   ·脓性分泌物中含有硫黄颗粒	①软组织化脓性感染，放线菌病、瘘管   ②原发性、化脓性肺部感染、足分枝菌病。	①内源性感染   ②外源性感染
①肺炎支原体   ②解脲脲原体   ③人型支原体   ④穿通支原体	·无细胞壁   ·人工培养基上生长繁殖的最小原核微生物   ·G-不易着色，吉姆萨染色淡紫色   ·“荷包蛋”样菌落	①原发性非典型肺炎   ②生殖道及新生儿感染   ③泌尿生殖道及新生儿感染   ④加速AIDS进程	①飞沫传播   ②性行为传播和垂直传播   ③接触传播
①伯氏疏螺旋体   ②回归热螺旋体   ③钩端螺旋体   ④梅毒螺旋体	·螺旋状，运动活泼   ·G-不易着色；Giemsa染色、Wright染色、镀银染色法及荧光抗体染色法	①莱姆病   ②回归热   ③钩体病   ④梅毒	①储存宿主哺乳动物，传播媒介是硬蜱   ②节肢动物传播   ③鼠类和猪是储存宿主。接触被排泄物污染的疫水传染   ④人是唯一宿主，性接触传播后垂直传播

第二十七章　病毒感染的实验诊断
病毒的基本性状
病毒是一类非细胞型微生物。
　　个体极小，可通过细菌滤器，需用电子显微镜观察。
仅含一种核酸作为遗传物质。（DNA或者RNA）
　　外被蛋白质衣壳或还有包膜。
病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。
复制周期：吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放。
采集和运送保存均在4℃，长时间保存需置-70℃。可以加保护剂。

病毒	核酸类型	所致疾病
流行性感冒病毒	（－）ssRNA	流行性感冒
副流感病毒	（－）ssRNA	感冒、支气管炎、肺炎
呼吸道合胞病毒	（－）ssRNA	婴儿支气管炎、肺炎
腺病毒	dsDNA	感冒、咽炎、扁桃体炎、肺炎
麻疹病毒	（－）ssRNA	麻疹
风疹病毒	（+）ssRNA	风疹、胎儿畸形
冠状病毒	（+）ssRNA	感冒、咽炎、SARS
病毒	形态结构	核酸类型	检验诊断	传播途径
HAV	球形，无包膜	（+）ssRNA	抗-HAV IgM	粪-口
HBV	大球形颗粒；   小球形颗粒；   管形颗粒	dsDNA	HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe	血液、血制品传播、性传播、母婴传播
HCV	球形，有包膜	（+）ssRNA	HCV抗体；HCV RNA	输血或其他非肠道途径传播
HDV	球形，包膜HBsAg	（-）ssRNA	HDV抗原；抗HDV IgM	血液、母婴、性传播与HBV同步感染或重叠感染
HEV	球形，无包膜	（+）ssRNA	抗HEV-IgM	粪-口

　朊粒
朊病毒就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有核酸的病毒。
第二十八章　真菌检验
一、真菌的基本特性
真菌是真核细胞型微生物，属于真菌界。
　　具有典型细胞核，有完整细胞器，不含叶绿素；寄生或腐生方式生存，由单细胞或多细胞组成；细胞壁含几丁质和（或）纤维素；能进行有性生殖和（或）无性生殖。




卡氏肺孢菌病是AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病。
隐球菌（新型隐球菌）印度墨汁作负染色镜检。
消毒灭菌的概念
消毒是去除或杀灭大多数微生物的过程。
灭菌是去除或杀灭所有微生物的过程。
实验室生物安全水平——生物安全基本设备
1.生物安全柜：
Ⅰ级：能够保护操作者和环境，不能保护操作对象；②Ⅱ级：对操作者和操作对象均有保护；③Ⅲ级：对操作者防护最好。
—般分为四级：
1.一级生物安全水平（BSL-1）实验室属基础实验室，常为基础教学、研究实验室，处理危险度1级微生物。
2.二级生物安全水平（BSL-2）实验室属基础实验室，常为诊断、研究实验室，处理危险度2级微生物。
3.三级生物安全水平（BSL-3）实验室属防护实验室，为特殊的诊断、研究实验室，处理危险度3级微生物。
4.四级生物安全水平（BSL4）实验室属最高防护实验室，供危险病原体研究，处理危险度4级微生物。
清除污染的方法有高压蒸汽灭菌（首选）、焚烧等。

更多考试资源分享，请关注公众号：雨佳学长

原文地址：https://zhuanlan.zhihu.com/p/641111800