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胶体金又被称作金溶胶,是在还原剂如柠檬酸三钠的作用下将金盐还原成金后形成的大小均匀的金颗粒悬液,且通过静电作用形成稳定的胶体状态。免疫胶体金技术有效地将抗原抗体特异性反应和胶体金作为示踪标志物结合在一起,已成为一种新型、独特的免疫标记技术,通过与免疫层析、斑点渗滤、比浊法等技术相结合,已成功的对蛋白质、激素、受体、细胞因子、血药浓度等生物活性物质进行了定量或半定量测定。该技术诊断简便快速,无需专业人员的操控和昂贵的仪器,结果易于判断。
免疫胶体金层析法
免疫层析技术是近年兴起的一种快速诊断技术,该技术将胶体金作为示踪物应用于抗原抗体反应,最常用的是免疫胶体金层析试纸条。通过硝酸纤维素膜的毛细作用,将含有待检物质的样品沿着膜上移,固定在膜上的受体与之结合发生特异性反应。抗原抗体复合物不断累积,胶体金标记沉淀显色,从而达到检测目的。Beegs M等最早使用该方法用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定,经过几年的发展,此法应用范围不断扩大。
斑点免疫金渗滤法
斑点金免疫渗滤试验,又名滴金免疫测定法。此方法不同于斑点ELISA法用酶作标记物,该方法用胶体金作为标记物,不影响蛋白质的生物活性,性质较为稳定。斑点金免疫渗滤法的原理同免疫层析法基本一致。不同的是,此方法是在渗滤装置上以液体滤过膜的方式进行,反应较为迅速。
胶体金免疫比浊法
胶体金免疫比浊法是一种新型的抗原抗体特异性结合的动态测定方法。其原理是:利用抗原抗体专一性特异性反应和金颗粒聚集导致颜色改变,将抗体标记上胶体金颗粒,待测样品中的抗原与多个抗体发生反应,产生抗原抗体复合物,使得胶体金颗粒聚集成大颗粒,从而导致溶液颜色发生明显改变,光吸收发生改变,光吸收的变化量与抗原抗体复合物的量呈正比,从而与抗原量呈正比,配合全自动生化仪可实现定量检测。胶体金免疫比浊法制作成本较低,反应后生化仪便于清洗,操作简便,反应快速,易于检测。
免疫胶体金技术应用——药物残留检测
近年来,农兽药在食品中的残留已经成为食品安全的主要问题之一。国内外农药及抗生素残留最常用的方法是仪器分析方法,包括高效液相色谱(HPLC),和高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS),由于它们的准确性和高灵敏度,这些方法被用作国家标准方法。但是,这些仪器价格昂贵,需要专业的技术人员。在检测之前还必须纯化样品,这可能是涉及使用大量有机溶剂。另外,这些方法耗时,并且不适合现场筛选大量样品。苯并咪唑(BZs)是一种合成的驱虫剂,广泛用于治疗动物的寄生虫感染。BZs具有广谱、高效、毒性低的优点。然而,滥用BZ的使用可导致耐药驱虫药残留在动物源性食品中。此外,动物实验表明,BZ具有一定的胚胎毒性和致畸性。为确保人类食品安全,欧盟和中国已为BZs在食物中设定了最大残留限量(MRLs)。因此,必须开发有效的方法和工具检测和量化动物源性食品中BZs的残留量。Guo L等制备了一种通用的单克隆抗体(mAb),可同时鉴定11种BZs,使用金纳米颗粒组装和标记免疫层析条带。该方法可以满足中国农业部设定的BZs的MRLs。这种快速简便的测试方法可广泛用于牛奶样品中BZ残留物的现场筛选。
<hr/>作为专业的胶体金试纸条开发制备服务商,德泰生物致力于为客户提供高品质、高稳定性的侧向免疫层析整体解决方案。无论是科研机构还是工业生产企业,我们都能满足您的定制化需求。
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