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[分享] CRISPR 技术有哪些作用?

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发表于 2024-12-25 17:54 | 显示全部楼层 |阅读模式

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CRISPR 技术有哪些作用?
原文地址:https://www.zhihu.com/question/543902856
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发表于 2024-12-25 17:55 | 显示全部楼层
CRISPR-cas系统是一个用来在DNA特定位置进行切割的工具,然而并非所有的CRISPR均可使得双链断裂,部分研究通过使cas9蛋白的单个或两个切割结构域失活,并融合新的酶使得cas9可以将这些酶转运到特定的DNA序列处行使功能。
例如,将cas9与可以突变特异碱基的脱氨酶进行融合,从而使胞苷突变形成胸苷。这种明确的基因编辑意味着你可以将致病突变转变为健康模式。然而该系统的应用并不局限于基因编辑,部分研究人员一直在研究使用CRISPR促进基因的表达,他们通过将cas9蛋白完全失活从而无法再切割DNA,之后将转录激活因子通过融和表达或短肽连接到cas9上,实现促进基因表达。
此外激活因子也可以召集到导向RNA上,之后激活因子召集细胞中的转录因子带来RNA聚合酶和其他因子,从而提高目标基因的表达。一个更超乎寻常的想法,是利用CRISPR将荧光蛋白与cas9蛋白结合形成复合体,这样就能看到特定DNA序列在细胞中的分布情况。这可以用来将基因组3D机构可视化或通过将整个染色体染色追踪其在细胞核中的位置。
如今,CRISPR已经改变了研究的面貌,然而这些新的想法表明现有的成果只是CRISPR研究应用可能性的冰山一角。
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发表于 2024-12-25 17:55 | 显示全部楼层
CRISPR(Clustered, Regularly  Interspaced, Short Palindromic Repeats)– Cas 系统在微  生物中进化,作为防御入侵噬菌体的防御机制。这个系统是一套基因编辑工具的基础,这些工具能够在从健康和诊断到农业和能源的广泛研究领域取得进展。更多内容请到默克生命科学官网查看:www.sigmaaldrich.cn
基因编辑是对DNA序列的一种特定的、有针对性的改编,涉及到DNA的添加、去除或修饰。CRISPR 系统通过两个主要组件完成基因编辑:
1、向导RNA(gRNA)
2、细菌来源的核酸酶(如 Cas9)
gRNA是一个特定的RNA序列,旨在识别核酸酶并将其导向目标脱氧核糖核酸区域,它由两部分组成:CRISPRRNA(crRNA)和反式激活crRNA(tracrRNA)。crRNA是与靶DNA互补的  17-20个核苷酸序列,因此根据靶基因而变化。相反,tracrRNA是一个不变的序列,作为将Cas核酸酶连接到crRNA的支架。
第一个CRISPR编辑系统使用了一个由两部分组成的gRNA复合物,由一个单独的crRNA和tracrRNA组成,但现在标准的做法是使用一个单一的gRNA(sgRNA)方法,将crRNA和tracrRNA结合成一个RNA分子。
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