免疫学的研究生期间 会做哪些实验？

营养师

免疫学的研究生期间 会做哪些实验？
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卡卡

现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导致了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文介绍免疫学常见的几种分子生物学实验技术。



图片源自@NIAID

一WB：蛋白免疫印迹（ Western Blot，WB）

WB 蛋白免疫印迹是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。
二IP：免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，IP）
IP 免疫沉淀技术是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础，用于研究蛋白质相互作用、或者蛋白质与遗传物质之间相互作用的经典方法
2.1、CHIP：染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation，ChIP)
研究体内DNA-蛋白质相互作用的分析手段。在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，超声破碎将染色质随机切断为一定长度范围内的染色质片段，用所要研究的目的蛋白的特异性抗体沉淀交联复合体，再经过蛋白质与DNA 解除偶联，纯化目的片段并检测。
2.2、RIP:RNA结合蛋白免疫沉淀（RNA Binding Protein Immunoprecipitation）
研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术。用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白，防止非特异性的RNA的结合，免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来，结合的RNA序列通过microarray（RIP-Chip），定量RT-PCR或高通量测序（RIP-Seq）方法来鉴定。
2.3、Co-IP：免疫共沉淀（co-inmunoprecipitation）
利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术，能够特异性富集所研究的目的蛋白。由于过程中采用了非变性条件，保留了互作及复合体的细胞内状态。相对于酵母双杂交、pull down等方法，其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内，保存了互作蛋白及复合体的“内源”状态。
三IHC：免疫组化（immunohistochemistry，IHC）‍
IHC免疫组化是应用抗原抗体特异性反应原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。
四IF：免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）
IF 免疫荧光技术是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。1、IF-IC 细胞免疫荧光 2、IF-F石蜡切片免疫荧光 3、IF-P 冰冻切片免疫荧光。
五FCM：流式细胞术（Flow Cytometry）
FCM流式细胞术用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。
六ELISA：酶联免疫吸附实验（Enzyme linked immunosorbent assay）
‍ELISA 酶联免疫吸附实验是将抗原或抗体结合在固相载体表面，利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应，实现目标物检测的免疫分析方法，可测至皮摩尔（pmol）,ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。（1）将已知的抗体或抗原结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性。（2）测定时，将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。（3）用洗涤的方法分离抗原-抗体复合物和游离成分。（4）加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量。
七MACS：磁性活化细胞分选法（magnetic-activated cell sorting）
MACS 磁性活化细胞分选法用结合了磁珠的抗体去标记细胞，让目的细胞带上磁珠，通过磁场将结合了磁珠与没结合磁珠的细胞分离开来。MACS是细胞分选的重要手段，设备简单，只需要一块磁铁，不需要专门的大型仪器，得到的细胞活性好，适合大多数的实验室。缺点就是能分选的细胞类型有限。
八FACS：流式荧光激活细胞分选术（fluorescence-activated cell sorting）
FACS流式荧光激活细胞分选术原理与流式分析一致，利用荧光素标记不同的分子，通过调节合适的电压、补偿等，通过荧光将目的细胞与非目的细胞区分开来。
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检验医师

我就是免疫专业的，科研型
对于免疫的研究生来说，做得最多的就是流式；其次，就是免疫荧光；WB也会做一些。当然，实验也会涉及到一些QPCR，病理，组化之类的

队长是我

不邀自来。背景国外免疫学小硕。实验涉及范围看你的课题。不过基本分为in vivo 动物模型，in vitro 细胞实验。涉及的实验技术可以包括但不限于，flowcytometry, WB, ELISA, PCR, qPCR, IHC, 等