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[分享] 为什么你的WB实验总是背景模糊?可能是稀释液没选对!

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发表于 2024-12-19 11:15 | 显示全部楼层 |阅读模式

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我们可以分析几种具体的抗体稀释液,以及它们如何帮助解决抗体稀释的问题:1 通用型抗体稀释液:这种稀释液适用于多种免疫检测实验(如IF、IHC、ELISA、WB)。它含有抗体结合反应增强剂和稳定剂,可以增加抗体的溶解度和稳定性,提高实验的特异性和灵敏度。例如,Genefist GF1600-1通用型抗体稀释液,可以在4°C保存和使用不少于六个月。2 脱脂奶粉:这是一种传统选择,优点是量多便宜,蛋白含量高。通常配制成0.3%至5%的水溶液使用,但可能存在发霉变质的风险,且不利于抗体的回收和保存。3 TBST/PBST:TBST(Tris缓冲液,含有Tween 20)是实验室常用的抗体稀释液,适合初次使用抗体时,可以反映抗体的效价和特异性。PBST(磷酸盐缓冲液,含有Tween 20)不适合用来稀释AP标记的抗体,因为磷酸盐会抑制AP活性。4 BSA(牛血清白蛋白):BSA通常用于稀释液中,起到封闭效果,减少抗体的非特异性结合。但市售的BSA可能有少量抗体残留,可能导至交叉反应和背景。5 市售的抗体稀释液:这些通常是经过优化的BSA,可能添加了叠氮钠以增加稳定性,但不适合稀释HRP标记的抗体。6 WB专用一抗二抗稀释液:这类稀释液适用于蛋白印迹实验,添加了抗体保护剂,可以提高特异性和灵敏度。例如,Boster的AR1017 Western专用一抗二抗稀释液。7 IHC稀释液:针对免疫组化实验设计的稀释液,有助于提高染色的清晰度和特异性。8 ELISA稀释液:用于酶联免疫吸附试验的稀释液,有助于优化ELISA实验的灵敏度和特异性。    选择稀释液时,需要考虑实验类型、抗体的标记类型、以及是否需要特定的保护剂或增强剂。例如,如果你正在进行WB实验,可能会选择Boster的AR1017 Western专用一抗二抗稀释液,因为它添加了抗体保护剂,有助于提高特异性和灵敏度。同时,确保遵循产品说明中的稀释比例和存储条件,以获得最佳实验结果。
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