手把手教你实验动物四氯化碳造模具体方法

生物科研实验室

#01腹腔注射构建模型选取6至8周雄性C57BL/6小鼠（体重约18-20g），首先称重并观察其状态，排除呼吸异常、毛发无光泽、行为异常或驼背等不健康个体。CCl4通常以0.5-0.7µL/g体重的比例稀释于玉米油中用于造模，而急性中毒模型则需更高剂量（0.8-2µL/g体重），但需在1-3天内安乐死小鼠。注意，注射液（CCl4或CCl4/玉米油混合液）应保持室温或接近体温。
为便于操作，建议固定注射体积为50µL，根据小鼠体重调整CCl4与玉米油的比例，确保总体积达到50µL。例如，20g小鼠需注入含10µL CCl4的40µL玉米油混合液，实现0.5µL CCl4/g体重的剂量。注射后一小时及之后每24小时检查小鼠状态。
实验终止时间及后续处理依据研究目的而定。若需观察炎性变化，建议24-48小时后收集组织；纤维化情况则在CCl4诱导2-4周后评估，6-8周后可观察到严重纤维化（肝硬化）。实验结束时，采用颈椎脱臼法安乐死小鼠。
#02吸入法构建模型吸入造模前，小鼠需先饮用含0.3克/升苯巴比妥的水一周。每笼最多放置6只小鼠进行CCl4吸入。实验前检查笼具与气体导管，将CCl4置于专用蒸发瓶中，导管深入液面下至少2-3cm。以2L/min的流速向瓶中泵入压缩空气，使CCl4挥发。将含有CCl4的空气管插入笼内。每周三次（如周一、周三、周五）进行短时间CCl4暴露，首周为起泡1分钟+气体氛围1分钟，次周为起泡1.5分钟+气体氛围1.5分钟，之后每周均为起泡2分钟+气体氛围2分钟。前三周每周一次诱导，第四周两次，之后每周三次。每次诱导前后，小鼠需在无CCl4空气中呼吸2分钟。处理后，笼子置于排风装置中10分钟再移出。若小鼠出现腹水（门静脉高压标志），应停止吸入，并根据研究目的进行实验或安乐死进行后续分析。
#03灌胃法构建模型鉴于灌胃法易导至高死亡率，故不推荐使用。
#04总结CCl4模型在肝脏疾病研究中具有重要价值，其成模率高且结果可重复。综合考虑，腹腔注射法更为便捷高效，是推荐的造模方法。