PCR最全讲解

生物医药

终于有人把PCR一次性说清楚了‼
大家在进行荧光定量PCR实验的时候，是不是会有很多的困惑呢？
那么 今天就给大家分享一些pcr干货吧！
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1️⃣它是什么？
PCR全称多聚酶链式反应（polymerase chain reaction），是一种非常强大的技术，可以通过一种非常简单但是高效的方法来复制DNA，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加
2️⃣它是怎么完成扩增的？
👉通常一次PCR反应进行30-35个循环，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍
3️⃣PCR实验原理图？
4️⃣实验前，需要提前准备什么？
DNA聚合酶一般分为普通的Taq聚合酶和高保真性聚合酶
若只是判断PCR产物是否存在特异性序列，选普通Taq聚合酶；若想要得到没有任何突变的PCR产物，需选择高保真聚合酶（以上是一般实验思维选择）
👉还需注意，进行T载体连接时，要了解高保真的聚合酶所得的产物是没有A末端的，因此在T载体连接之前需要进行加A反应。或者直接选用普通的Taq聚合酶