初步的胶乳试剂包被方法(抛砖引玉,抛砖引玉!!)
所需溶液:①. MES缓冲液 15mM,PH5.5 ②. PBS缓冲液 15mM,PH7.4 ③. PBS缓冲液 15mM,PH7.4,2‰BSA,0.1‰ NaN3 ④. 微球,抗体,EDC。 步骤: 1. 用液①配制EDC溶液(1mg/ml); 2. 用液①配制0.5ml的微球溶液(1%)。 3. 用液②配制1mg/ml的抗体溶液。 4. 搅拌条件下在0.5ml微球溶液中加入0.5ml的EDC溶液,室温反应15min。 5. 在1ml抗体溶液中逐滴加入活化好的微球溶液。 6. 室温包被反应2-4h。 7. 离心,10℃×20000g×25min。 8. 仔细分离上清液,用于检测剩余抗体含量。 9. 微球用2ml液③重悬,涡旋振荡或者超声混匀。 10. 室温搅拌封闭30-60min。 11. 离心,10℃×20000g×25min。 弃上清,微球用4-6ml液③重悬,涡旋振荡或者超声混匀。 |