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[分享] 警惕新冠核酸提取时的胍盐(盐酸胍、异硫氰酸胍)残留​!

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发表于 2024-11-11 05:56 | 显示全部楼层 |阅读模式

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就目前的数据来看,疑似病例的病毒核酸检测假阴性颇高。其中原因除了病人病程、采集方式、样品送检方式(pooling)等,还有很重要的一部分来自核酸检测试剂盒本身。
  尽管做好了防疫常态化的准备,疫情反弹及严峻形势还是让人始料未及。新冠病毒检测及结果又一次成为社会关注的焦点。
  新冠病毒检测有多种方法,包括核酸检测、抗体检测、电镜、免疫组化等。国家卫生健康委办公厅公布了针对新冠病毒的最新实验室检测指南,主要还是采用经典、成熟的实时荧光定量qPCR来进行鉴定。


  然而,就目前的数据来看,疑似病例的病毒核酸检测假阴性颇高。其中原因除了病人病程、采集方式、样品送检方式(pooling)等,还有很重要的一部分来自核酸检测试剂盒本身。据了解,多个CDC批准的新冠样本核酸提取试剂盒都含有异硫氰酸胍(GuSCN)和盐酸胍等组分。如果异硫氰酸胍残留在样本中,不会明显改变核酸样本在260nm处的吸光值以及核酸测量浓度,因此使用分光光度计可能检不出胍盐残留。但是,残留的异硫氰酸胍(GuSCN)可引起聚合酶变性,从而抑制qPCR反应,最终可能影响检测结果。


   异硫氰酸胍(GuSCN) 不会明显改变核酸样本在260nm处的吸光值


  增加异硫氰酸胍(GuSCN)浓度会提高Ct值

原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/441396339
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