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[分享] 原位杂交的原位是什么意思?

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发表于 2024-11-6 23:28 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-11-6 23:28 | 显示全部楼层
直接用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交,因未改变核酸所在的位置而成为原位杂交。原位就是杂交时没有改变核酸的所在位置的意思。
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发表于 2024-11-6 23:28 | 显示全部楼层
我们一般是先用固定剂将细胞中的各个成分如蛋白,dna,rna等固定在生前的位置上,这个可以理解为---原位,再用特定的探针,我们实验室是用rna探针来检测特定细胞中rna的表达情况
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发表于 2024-11-6 23:29 | 显示全部楼层
就是原来的位置,因为有时候需要利用多种不同的探针,为了保证结果的一致性和相互的对比,不能改变染色体或者细胞的位置。
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发表于 2024-11-6 23:29 | 显示全部楼层
in situ hybridization 翻译过来就是原位杂交,这里主要是指检测细胞中DNA 或RNA的生物学方法。以检测RNA为例,活体内特定细胞的转录本水平是不一样的,所以细胞中mRNA的表达也是不一样的,通过体外转录合成某基因的生物素标记探针,能够使得探针与细胞中的这个基因的mRNA进行特异性碱基互补杂交反应,从而通过酶联反应将此生物素探针杂交的mRNA位置指示出来,也就是检测得到该基因转录出来的mRNA的表达位置。
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发表于 2024-11-6 23:30 | 显示全部楼层
一般杂交的时候,要经过DNA提取电泳,然后转膜,杂交。原位杂交是将细胞经过处理,固定在载玻片上,该细胞所包含的染色体不经提取,在固定细胞的载片上直接变性染色体,然后用探针进行杂交。相当于直接在细胞中进行杂交。看结果图:


这是荧光原位杂交,绿色是杂交后的DNA。
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