如何研究一段新基因的功能？如何研究一段基因在细胞内的定位以及该基因表达出的蛋白质在细胞内的定位？

幸福侠侣

考试题目，自我感觉范围太大，不知如何下笔，非常茫然。故向知乎求助，希望能够得到回答啊！
原文地址：https://www.zhihu.com/question/23676934

同花顺

一种具有穿越血脑屏障（BBB）的最大发射峰超过1500 nm有机组装体，用于原位脑胶质瘤（GBM）的近红外IIb窗口（NIR-IIb）光诊疗。  首先制备了有机小分子IR-1064的组装体，随后用胆碱和乙酰胆碱类似物在其表面进行原位聚合修饰，得到组装体LET-12，其最大吸收峰在1400 nm，发射峰在1512 nm，可拖尾至1700 nm以上。LET-12可以通过大脑胆碱样受体介导的转胞吞作用有效地穿过BBB并在肿瘤组织中富集，从而实现原位GBM的荧光/光声（FL/PA）双模态成像。同时，基于LET-12良好的光热转换性能，还可以作为光热治疗剂，明显抑制小鼠原位GBM。

同花顺

谢邀。
问题真的很大……大概说一部分吧，其实我是拒绝的，因为真的知道不多。
功能研究主要思路：
1、亚细胞定位、时空表达谱；
2、转录调控；
3、生化研究；
4、表型分析。
功能研究技术：
一、计算机预测：随着生物信息学发展，基于同源性比较，已有软件（BLAST等）可实现该功能，不过其获得的功能信息精确度、准确性不高，结果仍需实验验证。
二、实验研究：
传统遗传分析：从表型到基因型的研究思路，通常基于两单因素差异群体进行，比如现在常用的GWAS等。根据紫外线诱导/试剂处理使群体中产生突变个体，经遗传分析定位突变基因。也可与现行基因功能研究思路结合。
现行基因功能研究：从基因出发，推至表型。
1、基因失活：以基因敲除为例，通过构建载体重组/电穿孔、显微注射等方式将重组DNA转入受体细胞核/筛选培养/将击中细胞转入胚胎，构建转基因动物模型/对模型观察检测。可以借此研究基因与表型的关系，得到部分结论。其它技术包括转座子标签法、内含子归巢突变等。
2、基因过表达：技术路线分两种，一种是增加基因拷贝数，另一种采用强启动子促使基因过表达。
3、RNA干扰：从表达水平研究基因功能，例如反义RNA技术。
4、噬菌体展示：该筛选技术可建立肽库，进而研究抗原表位图谱、蛋白质互作、非肽配体模拟物、候选突变体。
5、酵母双杂交：该技术可研究活细胞体内蛋白质互作，灵敏度高，可捕捉到微弱/瞬间的互作关系，可用于细胞内抗原抗体互作、药物靶点互作研究。
6、其它。
基因定位方法：
1、体细胞杂交法。
2、原位杂交、荧光原位杂交。
3、连锁分析。
基因编码蛋白定位：
亚细胞定位常见方法包括密度梯度力离心（可结合western bolt）、免疫组化、免疫荧光、胶体金、构建融合基因（如GFP-目的基因）等。

感恩由您

同考生，估计用绿色荧光蛋白基因融合表达