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[分享] 干货分享!盘点几种组织切片时处理要点

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发表于 2024-11-6 09:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

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一、淋巴结组织处理要点
1、淋巴结组织特性为结构紧密、细胞繁多,取样时需确保组织片厚度均匀,推荐0.2-0.3cm为最佳;
2、因淋巴结外包一层坚韧的结缔组织膜,阻碍液体渗透,故固定时间需延长至6-12小时,甚至可整夜固定,次日与常规组织同步脱水。若采用中性甲醛固定及乙醇脱水,两者时间均需加倍,同时可适当缩减二甲苯透明步骤的时间;
3、切片时,目标厚度为2-3μm,此厚度下组织易碎,展片时易出现皱褶、裂隙及不平整。因此,蜡块不宜过度冷冻,修至最大面后,以拇指轻沾温水预热5-6秒,迅速用冰块冷却3-4秒后立即切片,此法可确保切片完整无裂,且连片效果好;
4、展片水温需控制在35℃左右,过高难以消除小皱褶,过低则导至切片不平、贴片不牢易脱落;
5. 苏木精染色时间需短于常规,约3-5分钟即可,或专为淋巴结等实性组织设计一套染色程序。
二、脂肪组织处理要点
脂肪组织内含丰富脂肪滴,难以被脱水剂彻底溶解,石蜡渗透亦不充分,导至组织固定困难。固定旨在增加组织硬度,便于后续制片。因此,关键在于延长固定与浸蜡时间,同时取材不宜过厚。
切片时,需修至最大面,随后以冰块贴附蜡块冷却5-10秒,迅速切片。低温能使未完全脱透的脂肪滴暂时凝固,确保切片完整。切片厚度建议设为5-6μm,裱片与捞片操作需迅速,且裱片温度需控制在42℃以下。
三、骨髓及骨组织处理要点
骨髓与骨组织制片中,脱钙步骤至关重要。骨髓组织常用7%盐酸水溶液进行脱钙,因组织硬度各异,脱钙时间需灵活调整。
时间过短,组织过硬,切片易散;时间过长,组织色泽发灰,影响诊断。骨髓组织脱钙至漂浮状态即可,一般需2-5分钟。骨组织切片前亦需脱钙,常用17%硝酸水溶液,处理时间为12-24小时,或直至大头针能轻易穿透。
切片前,蜡块需缓慢、薄层修整,尤其是薄骨片,以避免切片时损失骨组织。烤片时间需适当延长,以确保贴片牢固,防止脱片。
四、皮肤组织处理要点皮肤组织层次丰富,结构复杂,各层致密程度不一,故脱水时间可适当延长。包埋时,需确保皮肤及其皮下组织位于同一平面,以保障切片能完整展现皮肤各层结构。
切片时,应将蜡块中皮肤组织表层朝上固定于切片机,遵循由里至外的原则,最后切割角质层。此操作有助于制作完整的切片,因角质层密度高,易碎裂,故烤片时间可适当延长,以增强贴片牢固度,防止脱片。
五、脑组织处理要点
脑组织质地疏松,组织量少,且柔软易损。取材时,建议厚度控制在2mm以内。脱水效果不佳会影响浸蜡质量,因此可适当增加脱水时间。脱水后的脑组织变得更为脆弱,包埋时需轻柔操作,避免重压导至组织破损。
切片时易粘刀,且皱褶难以展开,故需在冰箱中冷冻更长时间。切片方法可参考淋巴结组织处理,展片时,可先置于凉水中使小皱褶完全舒展,再转移至载玻片,于展片机中充分展开。烤片时间需严格控制,不宜过长。
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