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[分享] 培养基的配制步骤

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发表于 2024-11-3 14:57 | 显示全部楼层 |阅读模式

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 1.未开封的干粉培养基保质较长,已开封的保质期会变短。在瓶体上注明开封日期,用后拧紧瓶盖。个别品种易变质,如SC增菌液,可冷藏保存。
  2.若干粉培养基结块或颜色发生改变,不得使用。
  3.配制用水可用蒸馏水、去离子水等,电阻率不小于30万Ω•cm,每批应检查一次。
  4.称量干粉培养基时为避免污染,可用专用角匙。
  5.自行配制的培养基,各营养成分应按要求顺序加入,避免产生沉淀。
  6.盛放培养基的容器不宜用铜或铁锅,以防其离子混入培养基影响微生物生长。
  7.称量好的干粉培养基应先溶解再高压灭菌。
  8.自行配制的培养基应完全溶解后再调PH。PH值须冷后测定,因培养基所含成分不同,对冷的和热的进行测定,其PH值相差很多。培养基的PH值须精确测定,否则会影响微生物的生长和反应地观察。另外,PH值不可反复调试,否则会影响培养基的渗透压。
  9.需要加热煮沸的培养基应避免溢出,应边搅拌边加热。烧糊的培养基,其成分已改变,不得使用,应重配。
  10.不须高压灭菌的培养基,配制用水及盛放的容器可于配制前先进行高压灭菌。
  11.配制好的培养基一般采用高压灭菌,且应立即灭菌,以防微生物生长消耗养分而改变培养基成分。
  12.压力蒸汽灭菌器应定期检定,平时可用生物指示菌法和化学变色纸片进行灭菌验证。灭菌时应注意排除冷空气。含糖或特殊培养基应按要求选好灭菌温度及时间。
  13.灭菌后的培养基应迅速冷却到所须温度,避免长时间保存在灭菌锅中,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。
  14.配制的培养基的量应恰当,未用完的可注明配制日期,并且应该在最长保值期内用完。配好的培养基应避光、冷藏保存防止蒸发。
  15.凡受污染长过细菌的培养基,不得灭菌再用。
  16.三(双)糖铁琼脂斜面试管塞不宜塞的过紧,否则容易影响斜面碱性反应;LST如果试管塞过紧,影响排气,可导致灭菌后小倒管内仍有气泡。
  17.需要加添加剂或抗生素的培养基应即配即用。
  18.固体培养基如储存太久,使用前应再加热一次,使其表面湿润以利细菌生长。

原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/27688801
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