（技术篇）荧光免疫分析仪核心组件---光学模块

Rose

作为POCT领域应用最广泛的技术，荧光免疫检测技术将荧光侧向层析试纸条与对应的荧光免疫分析仪配套使用，可实现检测指标的精准定量测试。

1、荧光免疫层析技术
荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。对于带有多个抗原决定簇的大分子抗原(蛋白、病毒、致病菌等)，通常采用“三明治”型双抗夹心免疫层析方法，即待测物在流动相作用下先与荧光标记抗体结合，当到达检测线时再与包被抗体结合形成双抗夹心的“三明治”型。（以上信息来自百度）


2、荧光免疫分析仪
荧光免疫分析仪是一种对荧光信号进行激发和测量的设备，其结构包括光学测试模块、运动机构、操作交互软件，打印模块以及数据通信部分。其中运动机构与光学测试模块配合完成整个测试过程，测试过程中运动机构推动光学测试模块或试剂卡条运动，通过光学模块的激发光依次照射试剂卡条的检测区域，在检测线和质控线处激发出荧光，配合相应的算法，从而完成检测。
3、光学模块
光学模块为荧光免疫分析仪核心组成部分。主要元件包括：


1） 光源部分
光源部分多采用LED灯，其主要作用为提供特定波长的激发光，检测过程中通过激发光照射荧光物质，激发出荧光信号，从而完成检测。光源的波长需根据荧光物质来确定，常用的波长为365nm，470nm等。
一般情况下激发的波长小于荧光波长，但在一些上转发光平台中激发光波长大于荧光波长。
在常规荧光免疫分析仪中在同一时刻既有荧光信号也有激发光信号，而在一些时间分辨的荧光免疫分析仪中，因发光材料的性质不同，激发光熄灭后的一段时间内，荧光信号还会存在，在这种系统中，在采集荧光信号的同时，可将激发光关闭，从而减少对荧光的干扰，让结果更准确。
2） 滤光片
为了减少杂光对测试的干扰，常需要在激发和接收光路上设置滤光片，包括激发光滤光片和接收光滤光片。
根据需求的不同，可选择不同截止深度的滤光片，绿光片截止深度越深，对杂光的过滤效果越好，但也会导致对光的衰减越大，影响激发出来的荧光强度，同时滤光片的成本也越高。
所以，需要综合考虑滤光片的截止深度。
3） 二向色镜
在激发光和荧光有重叠光路的光学系统中，常通过二向色镜来进行光路设计和选择，二向色镜通过镀膜工艺可实现允许某一波长的光直接通过，而实现某一波长的光被反射。
在如下所示的光学系统中，通过二向色镜的反射作用可将改变激发光的路径，使激发光照射到试剂条上，而激发出来的荧光则可通过二向色镜直接到达接收单元，完成信号的接收。


4）平凸透镜
平凸透镜的作用，主要是实现光路的聚焦，在需要的地方得到所需要的光斑尺寸。
5） 信号接收部分
信号接收单元可实现光信号的接收和转换，主要器件为光电二极管和配套的硬件转换电路。
在选择光电二极管时需要考虑其对所检测波长的影响灵敏度和转换效率，同时要考虑其本身噪音的大小和波动情况。
随着技术的进步和检测领域的不断拓展，荧光层析检测技术以其检测准确，操作便捷，低成本的优势已经广泛应用到了疾病检测，动检，食品检测，毒品等领域。

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