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通过微生物的测试,可以掌握食品中微生物的种类、数量、活性等,为食品的品质监控及安全性评价奠定基础。为确保检验结果的准确、可靠,必须遵守一套标准及控制方法。例如,要确保试验环境和劳动工具的清洁,避免由不洁的环境或器具的污染造成的污染源;确保工作人员各项作业的符合标准,避免因人为因素造成的错误后果等。在微生物检验过程中,一定要做好相应的防范措施,才能保证检验结果的准确。
1.微生物检测培养基的使用注意事项
在微生物检验中,培养基的选用是一个非常重要的步骤。培养基的质量对微生物的生长及鉴别效果有很大的影响,所以在应用培养基时要注意:
(1)要看保质期及开瓶时间。每一次配制的培养基都要核对生产日期和瓶子的密封情况,确保其没有变坏、没有受潮的情况。
(2)称重准确。在培养基制备过程中,称重、分液等是保证培养基质量的基本依据,因此需严格控制其剂量。
(3)现场配制和消毒。培养基必须现配即用,未经消毒的配制好的培养基不要存放太久,也不可过夜,以免培养基受到污染。
(4)恒温恒压杀菌。在杀菌过程中,必须保证恒温和恒定压力,并保证有效杀菌时间,才能完全杀灭菌种。
(5)保存。经过消毒的培养基放入冰箱中,最多可以保存一个星期,通常不会超过3天。按照“先入先出”的原则,先配后用,防止发酵过程中出现的问题。
(6)控制温度。在使用时,应按照当值的用量,用水浴锅将培养基融成液体,并适时地降低水浴的温度备用。倒入48℃的培养基,不能太热,以免烫伤了菌种。但也温度也不能太低,否则发酵后的培养基就会凝结,不利于观察。
(7)进行空白实验。每个培养基都要作空白,这样有助于排除介质中可能含有的杂质,从而影响实验结果。
(8)不要经常开瓶。应尽可能集中取样,防止多次开启同一瓶培养基塞,增加了被污染的可能性,造成错误的结果。
(9)及时倒出多余的介质。当培养基余量太少时,可以将其倒入空白平板中,以确保空白测试的准确度。
2.样品采集注意事项
(1)在取样过程中,取样器的无菌操作是影响分析结果准确可靠的关键。对玻璃器皿,通常采取干热消毒的方法,保持恒温和充足的时间。在使用之前,要用75%酒精对采样筐、电子秤面、采样勺、采样袋等进行消毒,确保采样筐、电子秤面、采样勺、采样袋等的清洁消毒,或者在超净工作台上用紫外线灯进行消毒。
(2)在采样之前,工作人员要注意手部的清洁与消毒,采样之前要双手做好消毒工作,避免人为污染。采样完毕后,应立即将采样送至超净工作台。当取样时,应先用75%的酒精棉球擦拭取样袋的口部,然后再打开。将样本加入到盐水瓶中的时候,要小心汤匙和塑料袋不要碰到瓶子的顶部。100倍稀释的时候,1毫升的吸管要伸进盐水里,不能让试样顺着管壁往下掉,而且要注意不要把管子的底部戳破。水的温度控制在40℃左右,水温过高会杀死一些微生物,水温过低则不利于样品的充分溶解。在倒入时要小心,不要让培养基瓶口碰到平皿。测试结束后,立即将其装入相应的培养器中,并将其清洗干净。
(3)实验室要保持清洁、干燥、通风并有规律的消毒。对实验室中产生的各种废物、污染物质,要进行彻底的净化和无害化处理。同时,为保证工作人员不受微生物污染,必须配备防护衣、手套和口罩。
(4)实验室要保证其运行良好,并及时进行维修。为了保证测量仪器的准确、可靠,必须对主要的测量仪器及重要的仪器进行周期性的校验。同时,在试剂采购、验收、贮存、使用过程中,要有一套严密的试剂管理体系。由于试剂的品质对测试结果的准确与否有很大的影响,所以在使用过程中,必须选用有品质保证的试剂供应商,并对其进行定期的质控。
在微生物检测期间,应对培育箱内的温度进行实时监测,使其处于适宜的温度下。同时,要严格执行《微生物检验规范》的规定,对检测结果要做好记录,发现不正常数据和情况,要及时分析原因,并将其反馈给上级部门。
南安市疾病预防控制中心 叶招兴/文
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