数字PCR在研究基因表达方面的实验设计，需要做内参吗？需要做技术重复吗？什么原因呢？

奋斗的小鸟

我想咨询下数字PCR在研究基因表达方面的实验设计，还需要做内参吗？还需要做技术重复吗？为什么？

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数字PCR是直接测样本里面的目的基因拷贝数，实验设计是要看你的实验目的，比如说测某个样本里面的某个基因的突变频率，一般都是加入不同荧光标记的突变型和野生型的探针，跑完直接统计突变型，野生型，杂合子的拷贝数，直接计算突变频率即可。没有必要设内参，但技术重复是可以设的，可以增加实验可靠性。