看这里！Western Blot 条带结果图分析

HaHa

• 条带有拖尾，表明蛋白质量不好，有降解；可能提蛋白过程动作太慢或蛋白保存条件不当; 提蛋白全程冰上操作，最好用新提的蛋白跑WB
  

图1

2. 显然目的蛋白量非常少，且每个样品定量不均一，曝光时间很长；定量时可以提高蛋白量或RIPA量减少



图2

3. 条带有粗有细，与2中相同的问题，蛋白定量不均一；也可在电泳时压缩胶稍微长些，通过压缩使条带均一化



图3

4. 这是一个典型的没封闭好的条带，膜上到处是黑色非特异的结合；一般都是5%脱脂奶粉室温孵育2小时



图4

5.最后放一张好看的图吧~~·~



图5

总结：WB实验想要做出好看的图与趋势，从蛋白提取开始环环相扣；提蛋白全程冰上操作尽可能避免蛋白降解（这一步非常重要）；定量均一；封闭重组等等。如果每一步都做的完美无瑕，结果只能听天由命啦！

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