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液体活检是近年来兴起的一个全新概念,主要相对于传统的组织活检。传统的组织活检主要通过有创手段获得部分病灶处组织样本,通过对这些样本进行分析检测,获得疾病的相关信息。而液体活检指的是通过无创或微创手段获得患者的部分体液成分,通过一系列高通量组学技术分析其中的游离DNA片段,外泌体或游离肿瘤细胞成分,获得疾病相关信息。目前,液体活检主要应用于肿瘤相关领域,有潜力成为未来肿瘤诊断与临床监测的重要手段。
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外泌体(Exosome)指的是由细胞分泌出的微小囊泡,这些脂质双分子层小泡中包含有蛋白质、DNA、mRNA以及miRNA等一些非编码RNA,可以作为细胞与细胞之间的沟通信使。机体的疾病状态可能会改变细胞的外泌体产生。因此,在肿瘤相关领域已有较多的外泌体相关研究。研究认为外泌体与肿瘤的发生发展密切相关,通过分析检测循环系统中的外泌体,可以为肿瘤的早期诊断、恶性程度分析、预后检测、疗效评估提供有价值的信息。
外泌体携带的信息多种多样。其中包含的蛋白质和核酸成分,均可用于提供疾病相关的信息。此外,外泌体的数量比循环肿瘤细胞多,因此,容易富集。而作为分泌小泡,外泌体能有效保护其中的核酸成分不被降解,克服了外周血循环中核酸成分容易降解的问题。因此,外泌体检测具有很好的临床应用前景。但外泌体体积很小,直径往往在数十纳米左右,这也为外泌体的分离纯化与临床应用带来了困难。
目前,最常用的外泌体分离方法是超速离心,运用超速离心机可以得到大量的外泌体,但如此得到的外泌体可能与一些微粒成分或细胞碎片混杂,纯度较低,除此之外也可以通过过滤离心、密度梯度离心或类似循环肿瘤细胞的免疫磁珠法分离外泌体。
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目前,外泌体的研究尚处于早期发展阶段,以外泌体作为生物标志物的研究大多处于临床前研究或早期临床试验阶段。虽然到临床应用阶段仍距离较远,但外泌体有潜力成为一种重要的临床生物标志物。
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