FISH技术在白血病诊疗中的应用

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白血病现状
白血病是一类造血干祖细胞的恶性克隆性疾病，克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他非造血组织和器官，同时抑制正常造血功能。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛等。
根据国家癌症中心2022年全国癌症报告显示，作为我国十大高发肿瘤之一，我国2016年白血病发病人数为8.6万人，发病率为5.1/10万，排在第13位[1]。


白血病的遗传学检测
临床上白血病检测手段众多，除了血常规、骨髓细胞形态学鉴定、免疫表型分析以外，遗传学检测也是不可或缺的实验室检测手段之一[2]。


细胞遗传学对白血病分型、诊断、治疗和评估预后都具有重要的意义。尽管常规核型分析为白血病的诊断分型和预后评估提供了许多重要信息，但仍存在困扰染色体研究的因素，如分裂相少、质量低劣、核型异常复杂。相较于临床染色体核型分析可能出现的低分辨率情况，荧光原位杂交技术（Fluorescence In Situ Hybridization，FISH）是一种快速、简便、分辨率高、特异性高与敏感性高的技术。该技术利用碱基互补配对，将荧光素标记的探针直接杂交到染色体标本上，通过检测荧光信号，对染色体或基因异常进行定性、定位及相对定量的分析[3、4]。


FISH | 白血病诊疗应用
1、辅助诊断及疗效监测
如慢性粒细胞白血病的BCR-ABL融合基因检测、急性粒细胞白血病M3中的PML- RARA融合基因检测、M2b中的 AML1-融合基因检测等。
2、微小残留病灶的检测
由于白血病患者经化疗缓解后，体内仍残留一定数目的白血病细胞，这些残留的白血病细胞是导致复发的根源。通过对肿瘤细胞特异的染色体异常进行跟踪监测，可间接了解体内白血病细胞数量变化，便于了解病情进展和是否出现复发迹象。如伴有t(15；17)APL、伴有t(8；21)的AML、伴有11q23／MLL重排的急性白血病等检测提供了直观、敏感和特异的指标。
3、细胞移植的植入状态监测
异基因造血干细胞移植已经成为治疗血液系统恶性、非恶性疾病的有效手段。FISH检测技术（如性染色体和BCR-ABL融合基因检测等）可以协助临床判断移植后供体干细胞是否在受者体内植活，以判断移植成功与否，从而指导移植后的治疗和预测复发风险。
4、预后判断
基因的缺失有助于对肿瘤进行诊断以及预后判断。如通过FISH监测多发性骨髓瘤患者的P53基因缺失提示患者的预后很差，而在慢性淋巴细胞性白血病患者中，如检测到RB1基因的缺失则提示患者预后较好。

小结
随着分子遗传学的不断发展，FISH技术依然是细胞遗传学与分子生物学之间的重要桥梁，其优势不仅是前文所提到的种种，也是临床特殊病例中回顾性研究的主要检测手段。同时，FISH技术可以和多种其他检测技术（如流式细胞等）相结合，更好的发挥本身高灵敏、高特异性的技术优势。

【参考文献】
[1] Zheng, Rongshou, et al. "Cancer incidence and mortality in China, 2016." Journal of the National Cancer Center 2.1 (2022): 1-9.
[2] 黄静沁,许闪闪,李智等.白血病诊断综合分析的重要意义[J].检验医学,2014,29(11):1158-1163.
[3] 杨艳丽,杨长俊.DNA荧光原位杂交(FISH)技术在血液肿瘤诊断中的运用[J].中国医学工程,2013,21(02):54+57.
[4] 张海英,杨艳丽,赵强等.荧光原位杂交技术检测慢性淋巴细胞白血病分子遗传学异常[J].中国实验血液学杂志,2020,28(05):1474-1479.DOI:10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2020.05.008.

作者 | 程念念
编辑 | 盛亚琴
校对 | 郭   妍
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