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[分享] 何谓ELISA?简述其原理及临床意义?

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发表于 2024-9-25 16:01 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-9-25 16:02 | 显示全部楼层
  ELISA是一种免疫学检测,在基础科学研究、临床研究和诊断中有着广泛的用途。ELISA具有广泛的应用,包括涉及直接分析除草剂(如草甘膦)的环境研究、量化环境样品中的交叉反应除草剂以及检测食品科学行业中的食品毒素。农业和医疗行业也使用ELISA方法来测量激素和药物。在制药行业,ELISA通常用于药物发现、动物研究和临床试验,因为它们可以快速量化分析物浓度并且可以轻松实现自动化。通常,ELISA使用标准的8行12列格式的96孔微孔板进行。但是,微孔板的测量结果可能显示可重复的行和列模式以及不同程度的变异性。为了分析这些模式和变异源,实验人员可以使用SASAnalyst应用程序,它通过用户友好的图形界面提供基本的统计技术。该工具可以帮助实验人员检查和评估ELISA性能中的模式和变异程度,并提供可用作与统计学家讨论基本统计分析的指南的项目结果。


  ELISA常见用途


  临床诊断


  ELISA是临床环境中广泛使用的诊断工具。它可以检测血液或其他体液中是否存在特定抗体或抗原,因此可用于诊断多种疾病。该检测可作为诊断急性感染的替代工具,并且适合在资源有限的环境中筛查大量样本。基于ELISA的传染性血清学是准确诊断和预后最可靠的方法之一。目前已开发并上市了多种用于检测传染性病原体的先进检测方法。

  ELISA在临床诊断中的一些应用方式包括:

  1、传染病诊断: ELISA通常用于诊断由细菌、病毒和其他病原体引起的传染病。例如,ELISA可以检测人体对病原体产生的抗体,表明当前或过去的感染。ELISA用于诊断HIV /AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎、莱姆病和梅毒等疾病。

  2、过敏测试: ELISA可用于检测免疫系统对花粉、尘螨或食物等过敏原产生的特定IgE抗体。ELISA可帮助诊断过敏并确定引起症状的过敏原。

  3、自身免疫性疾病诊断: ELISA用于检测免疫系统产生的攻击人体自身组织的自身抗体。ELISA可用于诊断狼疮、类风湿性关节炎和多发性硬化症等自身免疫性疾病。

  4、癌症诊断: ELISA可用于检测肿瘤标志物,即癌细胞产生的物质,可在血液或其他体液中找到。ELISA可帮助诊断某些类型的癌症,例如前列腺癌和卵巢癌。

  5、药物水平监测: ELISA可用于监测血液中的药物水平,以确保药物处于治疗水平且无毒性。ELISA还可用于通过测量尿液中的药物或其代谢物的水平来检测药物滥用。

  生物医学研究


  ELISA是一种有效的技术,不仅在一般的生物医学研究中很有价值,而且可作为诊断工具。它可以检测出各种类型的极低水平和数量的生物分子。尽管存在局限性,但ELISA仍然是基础研究中的重要工具,并在过去几十年中改变了生物医学研究。

  ELISA在生物医学研究中的一些应用:

  1、蛋白质定量: ELISA通常用于定量样本中特定蛋白质的含量。这可以帮助研究人员了解细胞和组织中蛋白质的表达和调控。

  2、抗体检测: ELISA用于检测和量化生物样本(如血清或血浆)中的抗体。这有助于了解免疫系统如何对病原体或疫苗作出反应。

  3、药物研发: ELISA可用于筛选大量化合物库,以确定其与特定蛋白质的结合能力。这有助于识别潜在的候选药物以供进一步开发。

  4、生物标志物发现:生物标志物是可用于指示疾病的存在、严重程度或进展的分子。这可以帮助科科研人员检测和测量某些生物标志物,这些生物标志物有可能帮助诊断、监测和治疗疾病。

  药物研发


  ELISA用于药物研发,以确定新的药物靶点。该技术可用于识别与疾病相关的新型蛋白质、受体、酶和其他分子。它也常用于药代动力学和药效学研究。这些研究旨在研究药物如何被身体吸收、分布、代谢和排泄,以及其对靶分子的影响。ELISA可以测量血液、组织或其他体液中的药物浓度,这对于确定最合适的药物剂量和给药方案至关重要。

  此外,ELISA还用于识别药物反应或疾病诊断的生物标志物。生物标志物是疾病或药物反应的可量化指标,可用于诊断疾病、监测疾病进展或预测药物疗效。

  食品安全检测


  ELISA用于识别食品中存在的过敏原、病原体和其他污染物。这是一种廉价而快速的方法,可用于筛选大量食品样本以进行质量控制和安全目的。ELISA也是牛奶、鱼、转基因食品、辐照食品或其他可能影响人类健康的危险食品成分(如牛海绵状脑病)质量控制的重要技术。

  ELISA用于食品安全检测的许多不同领域,包括食源性病原体的检测、食品加工和生产的监控以及进口食品的筛查。

  环境监测:

  以下是ELISA在环境监测中应用的一些具体方式:

  1、水质检测: ELISA用于检测水中是否存在有害物质,如杀虫剂、除草剂和重金属。它还可用于监测饮用水或娱乐用水水源中是否存在可能导致疾病的病原体,如大肠杆菌和其他细菌。

  2、空气污染监测: ELISA可用于监测工业过程和交通排放的空气污染物,例如苯、甲苯和二甲苯。

  3、土壤分析: ELISA可检测土壤中是否存在对植物和动物有害的污染物,如重金属和杀虫剂。它还可用于监测土壤中是否存在病原体,如炭疽孢子。

  4、工业过程监测: ELISA能够监督工业过程中是否存在重金属和溶剂等危险物质,这些物质可能会排放到周围环境中。

  兽医诊断


  ELISA是兽医学中一种有价值的诊断工具,用于检测可能导致动物疾病的各种病原体,包括病毒、细菌和寄生虫。ELISA可用于诊断牲畜、伴侣动物和野生动物的传染病。此外,ELISA还是监测疫苗接种效果和动物群体中传染病传播的重要工具。此外,它还可用于检测牛奶和肉类等动物产品中的药物残留,以确保食品安全。此外,兽医学对低成本、快速和可靠的诊断结果的需求日益增长。

  ELISA用于兽医诊断的许多不同领域,包括:

  1、传染病检测: ELISA适用于识别各种动物病原体(如病毒、细菌和寄生虫)的抗体。

  2、动物种群筛查: ELISA可用于筛查动物种群中是否存在特定疾病,有助于防止疾病传播。

  3、疫苗有效性监测: ELISA支持监测动物对疫苗的免疫反应,确保它们免受特定疾病的侵害。

  免疫学研究


  免疫系统是人体的保护者,可以以细胞或体液(先天或适应)模式发挥作用。为了了解免疫疾病,评估和跟踪免疫反应的变化非常重要。多项研究表明,ELISA是测量和监测免疫反应变化的首选和最有效的方法。

  ELISA用于免疫学研究的许多不同领域,包括:

  1、抗原和抗体的检测: ELISA已用于检测各种生物样本(例如血清、血浆和组织匀浆)中抗原和抗体的存在和数量。

  2、细胞因子和其他蛋白质的量化: ELISA能够测量参与免疫反应的细胞因子和其他蛋白质,例如肿瘤坏死因子、干扰素和白细胞介素。

  3、研究对病原体的免疫反应: ELISA通过测量特定抗原和抗体的水平来协助研究对病原体(例如病毒、细菌和寄生虫)的免疫反应。

  ELISA的最新发展和未来方向


  最近的发展通过放大和信号增强策略增强检测方法,提高了检测灵敏度和检测限。与微流体和芯片实验室技术的集成可实现小型化、更快的分析和减少样品/试剂消耗,从而提高便携性。自动化ELISA流程通过自动化样品处理、试剂分配和数据分析提高了效率、减少了错误并实现了高通量筛选。使用ELISA进行个性化医疗和精密诊断可以帮助识别和测量特定生物标志物,从而实现个性化治疗和准确的疾病诊断。



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发表于 2024-9-25 16:02 | 显示全部楼层
详细解释:ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自 70 年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。
基础知识:ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
实验原理及反应:在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
临床意义: 通过酶与目标物的结合来检测和量化特定蛋白质或抗原的存在。它的优点包括快速、高效、灵敏度高以及广泛应用于医学诊断和生物学研究等领域。
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发表于 2024-9-25 16:03 | 显示全部楼层
酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
基本原理它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。
在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂)
②酶标记的抗原或抗体(标记物)
③酶作用的底物(显色剂)测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。
elisa的临床意义,要根据具体的检测对象来看,主要是检测样本的含量以及定性,仅供参考
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