ELISA里一抗和二抗的区别？

千姿百态

为什么加了一抗还要加二抗？
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长长的路

文章标签 : 抗体 抗原抗体反应 一抗二抗 科学 科普
     抗体有一抗和二抗的区别，抗体也称免疫球蛋白是免疫系统响应“外来”物质（即微生物上存在的抗原）而产生的糖蛋白。 每种抗体都是不相同的，它们会与其同源抗原结合并中和感染过程中微生物产生的毒素。抗体存在于血浆、血清、唾液和眼泪等体液中。事实上，它们约占血浆中蛋白质的 20%。




一抗


抗体结构
    抗体属于 Y 形分子，它的结构主要是由3个部分所组成的。
它们总共有4条链：即两条轻链与两条重链。这些链的特定结构和组合允许抗体分子同时与多个细胞结合。抗体分子的不同部分可以结合多种抗原，也可以结合一些效应分子。抗体的可变区或V区表示/指Y结构的两个臂，该区域可以与抗原结合。相比之下，Y 结构的茎被称为恒定区或 C 区，它只能与有限数量的效应细胞和分子结合。




抗体


一抗和二抗
     经常产生抗体用于研究。它们根据其结合能力和用途分为初级和次级。
可以与特定蛋白质或感兴趣的生物分子结合的抗体称为一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等动物为宿主，以单克隆 (mAb) 或多克隆抗体 (pAb) 的形式生产一抗。
MAb 或 pAb 各有优缺点，在选择一抗之前需要考虑这些优缺点。
MAb 由动物的单个 B 细胞克隆产生，因此仅针对抗原的一个表位。
PAb 由动物的多个 B 细胞克隆产生，并且具有针对抗原的几个表位的抗体的异质混合物。
MAb 非常适合相同的生产和标准化实验，并且产生的背景染色最少或不产生背景染色。在使用 mAb 时，与不需要的蛋白质发生交叉反应的可能性也降低了。
     由于 pAb 可以结合单一抗原的多个表位，因此它们能够识别抗原中的微小变化。它们还产生更强的抗原检测信号。因此，它们非常适合涉及变性蛋白质的实验。




二抗


一抗和二抗的区别于应用
      一抗可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。二抗则主要用于检测和纯化抗原蛋白。
     二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活。所以，它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。二抗类型的选择基于一抗的类别：免疫球蛋白 IgG 或 IgM、标签类型和来源宿主。

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    由于大多数一抗是使用少数宿主物种开发的，并且大多数一抗属于 IgG 类，因此制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗鸡 IgG 或抗山羊 IgG。所选择的二抗应始终能够识别产生一抗的宿主物种，例如，为了检测从小鼠产生的一抗，使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白质印迹中，标记通常是化学发光、比色或基于荧光的，但在流式细胞术和免疫荧光中，仅使用荧光标记。

检验医师

一抗：能和特异性抗原特异性结合的蛋白，包括单克隆抗体和多克隆抗体。
二抗：能和一抗结合，即抗体的抗体，利用一抗的Fc段去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对此抗体的免疫球蛋白
一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，使信号大大增强，可以提高实验灵敏度。
为什么加了一抗还要加二抗？因为可以放大一抗的信号呗

同花顺

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感恩由您

具体方法是什么？双抗夹心，捕获法，竞争结合？