您关心的流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI)，来了！

虎威将军

根据Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒（BD，#556420）：
1. 收集要用于细胞凋亡检测的细胞：离心（1000rpm，5min），去除培养基。
2. PBS洗1次后，重悬于1×Binding Buffer中（将10×Binding Buffer用蒸馏水稀释）。其中对照用400μL 1×Binding Buffer，其它处理组用100μL 1×Binding Buffer。
3. 取出100μL上述溶液至流式管中。
4. 加5μL FITC-Annexin V和5μL PI（50μg/mL）。其中对照细胞分为：不染色组、单染Annexin V组、单染PI组、双染Annexin V+PI组。
5. 轻柔弹起混匀，室温（25℃）避光孵育15min。
6. 加400μL 1×Binding Buffer至每管中，混匀。
7. 1hr内上流式细胞仪检测。
所需试剂、耗材及仪器：
15mL离心管，1.5mL EP管，Tip头，移液枪，流式管，PBS，蒸馏水，Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒，水平离心机，高速低温冷冻离心机，流式细胞仪。
结果示例及分析
四个象限的意义





四个象限的意义
左上/UL：坏死细胞；
右上/UR：晚期凋亡细胞；
右下/LR：早期凋亡；
左下/LL：未发生凋亡的细胞。
细胞凋亡率：UR与LR象限百分率的和。

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