PCR 技术的基本原理

good

       PCR — 聚合酶链式反应
       优点：方法操作简单，反应快速敏捷，结果可靠
       原理：与细胞内发生的DNA复制过程十分相似。

       是在模板、引物和4种dNTP（包含A、T、C、G四种碱基的脱氧核苷酸）存在条件下，依赖于DNA聚合酶体外扩增目的DNA的反应。

       模板：是指包含待扩增片段（目的片段）的一段DNA，可以是细菌和病毒的基因组DNA，细菌质粒DNA，也可以是病毒RNA经体外逆转录后形成的cDNA。

       引物：是指与目的片段两翼互补的一对单链DNA片段，一般由17-30个寡核苷酸组成。

       DNA聚合酶：耐热。商品化名称为Taq 酶

       PCR反应的3个步骤
       变 性(denaturation): 通过加热使DNA双链解开，成为单链DNA的过程
       退 火(annealing):反应混合液冷却至某一合适的温度，两个引物分别与两条单链模板的互补区域结合的过程  
       延 伸(elongation):反应温度再次升高，在DNA 聚合酶的作用下、 Mg2+存在的条件下，4种dNTP从引物的3’端开始参入，引物沿5’-3’方向延伸，合成出新生的DNA互补链。

       摘自本公司论坛——芯片上的实验室：http://www.pmmachip.com

原文地址：https://zhuanlan.zhihu.com/p/536312595