流式细胞仪种类：传统流式、全光谱流式与质谱流式

HaHa

大家好，我是流式荧光崔工，一个旨在链接与流式荧光相关的朋友，一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。
前面的文章交联APC和APC有什么区别？

回答了天天老师提出的问题。
昨天晚上听了一场直播，有一部分内容讲到了传统流式、全光谱流式与质谱流式。
以前也有很多老师问崔工：
传统流式、全光谱流式与质谱流式有什么区别，它们的优缺点又是什么？
那我们今天就来聊聊什么是传统流式、全光谱流式与质谱流式，它们有什么区别，它们的优缺点又是什么？
—1—
流式最早的时候是从流体力学发展而来的。

1738年， 瑞士物理学家、数学家丹尼尔·伯努利出版了《流体动力学》。
证实了流体在重力场中流动时能量守恒的原理。
这个原理就是后来广泛被用于在流式细胞仪上实现高速单细胞液流的基本原理。
并在随后的两百年时间里不断的演变发展。

1964年，美国科学家马克·富维勒（Mack Fulwyler）在Los Alamos国家实验室发明了第一台细胞分选仪。
1972年，美国库尔特推出第一台商业化光谱流式细胞仪，真正拉开了流式分析的序幕。
国产流式细胞仪最早研制于20世纪80年代初，但受到当时科技发展和国内生产力的限制，并没有商业化的产品问世。
至到2010年起才真正开始流式细胞仪的设计、研发和生产。
到目前为止已先后出现了层浪、唯公、胡曼、必达科、迈瑞等流式细胞仪生产厂家。
还出现了赛基、丽珠、四正柏、旷博、朗雅、达科为、美瑞特等流式试剂、原料生产厂家。
短短二三十年时间，流式技术在中国得到了高速的发展。

设备也从传统的流式细胞分析仪演变出了全光谱流式细胞分析仪、质谱流式细胞分析仪。
—2—
传统的流式细胞仪主要由四部分组成。
分别是流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。
基本外观如下：



内部结构图大致如下：



工作原理是将经特异性荧光染料染色后的待测细胞放入样品管中。
细胞在气体的压力下进入充满鞘液的流动室,在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。
细胞柱通过激光器激发出散射光信号和荧光信号,信号通过光过滤片后由各自的激光检测器收集信号。
再经光电倍增管(PMT)将信号放大,转变为电信号后由计算机系统进行分析。




—3—

质谱技术早在1906年，J.JThomson在实验中发现带电荷的离子在电磁场中的运动轨迹与它的质荷比有关。

并于1912年制造出第一台质谱仪。

质谱流式细胞技术是在传统流式和质谱技术的基础上发展起来的，它结合了流式技术和质谱技术，利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术。

国内出现了辰安、谱育等质谱流式细胞仪生产厂家。


质谱流式细胞仪有别于传统流式技术的基于荧光素进行抗体标记，它采用的是用金属标签抗体标记的细胞进入质谱流式细胞仪。

逐个通过ICP质谱检测装置，然后标记好的细胞就被分离成单个细胞并依次进入等离子体炬进行离子化。
然后被送入飞行时间质谱。
最后对每个细胞中各种金属标签进行定量检测。
进而得知每个细胞中各目标蛋白的含量。

由于通过每个离心飞行时间来统计的，跟光谱流式分析完全不一样，这就不用进行荧光补偿了。




—4—

全光谱流式跟传统的流式是比较像的，包括仪器的结构、检测原理、所使用的荧光染料等原料基本上都一样。
唯一不同的就是，传统流式是实时反应测试结果的，由于各滤光片有滤光误差，多种荧光染料同时检测时会导致很多荧光遗漏或增加，这样就需要调补偿。
而全光谱流式是事项每个染料上机一次，形成标准，仪器会自动把所有的染料对应的荧光光谱组合成一个方案。

后面多种染料同时上机检测时，仪器通过染料的波形去方案库里寻找对应的方案，然后再把这个方案预先储存的波形调用出来显示出来。






讲到这，我们把传统光谱流式、全光谱流式和质谱流式讲完了。
你要问崔工那个好，崔工说了不算，市场是最好的裁判，大家看市场就明白了。


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