微生物学检验

二维码

光学显微镜
相差显微镜
暗视野显微镜 动力及运动状况
荧光显微镜
电子显微镜（ 透视显微镜 超微结构。
扫描显微镜  表面结构及附件和三维立体图像的观察)
革兰染色 初染 煤染 脱色 复染
     （结晶紫 碘液 乙醇 稀释碳酸复红）
抗酸染色 根据所见结果报告“找到(或未找到)抗酸菌” 可作出初步报告

培养基的主要成分 营养物质 水 抑制剂 指示剂 凝固物质
营养培养基 在基础培养基上加入血液，血清及生长因子等一些特殊成分，供其营养要求高或需要特殊生长因子的培养基。血琼脂平板和巧克力色平板
鉴别培养基  利用细菌分解糖或蛋白质的能力不同及代谢产物的差异，在培养基中加入特定作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌
半固体培养基 0.3%－0.5%
固体培养基     1.5%－2.0%
大题  培养基的制备
调配
溶解
校正  PH 7.2－7.6
分装 不超过2/3
灭菌 高压蒸汽灭菌 103.4kpa  121.3摄氏度 20－30min
       间歇蒸汽灭菌  80摄氏度 30min
       滤过除菌器
       血清凝固器
质量检验   无菌试验和效果检验
保存          4摄氏度保存一周
                   塑料袋保存两周
需氧培养法
二氧化碳培养法   5%－10%CO₂   奈瑟菌和布鲁菌
                         （二氧化碳培养箱，灼缸法）
微需氧培养法  5%－6%O2       56%N2
   5%－10%CO2    幽门螺杆菌、空肠弯曲菌
厌氧培养法 （气袋法，厌氧罐培养法，厌氧手套箱法）
细菌在液体培养基中的生长现象
浑浊生长 表面生长 沉淀生长
  细菌在半固体培养基中的生长现象
有鞭毛 呈羽毛状或云雾状浑浊生长
糖类发酵试验(OF)  重要
细菌发酵葡萄糖，需氧分子的称为氧化型
细菌发酵葡萄糖，不需要氧分子的称为发酵型
不发酵葡萄糖称为产碱型
甲基红（MR)
细菌在代谢过程中分解葡萄糖产生丙酮酸，并进一步将丙酮酸代谢为乳酸，乙酸和甲酸，使培养基的PH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂显红色，为甲基红试验阳性
VP试验
细菌在代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性溶液中，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与培养基的精氨酸所含的呱基结合，形成红色化合物，即为试验阳性
吲哚试验
有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚，吲哚与对二甲氨基苯甲醛作用，形成红色的玫瑰吲哚
尿素酶试验
某些细菌能产生尿素酶，分解尿素生成大量的氨，使培养基呈碱性，酚红指示剂变红
氧化酶试验
氧化酶的细菌氧化细胞色素C，然后氧化型细胞色素C对苯二胺氧化，生成有颜色的醌类化合物。再使用盐酸二甲基对苯二胺时，产物呈紫红色，使用盐酸四甲基对苯二胺，产物呈蓝色
应用  主要用于肠杆菌科⁻和非发酵菌＋  的鉴定
过氧化酶试验（触酶)
有些细菌具有过氧化氢酶，可把过氧化氢分解成水和氧，进而形成分子氧出现气泡
试剂  3%过氧化氢溶液
应用  用于革兰阳性球菌的初步鉴定。
葡萄球菌属和微球菌属触酶试验阳性，链球菌属触酶阴性。
CAMP试验
B群链球菌产生一种CAMP因子//，能促进葡萄球菌的β溶素的溶血活性，在B群链球菌和葡萄糖球菌生长线交界处溶血力增加，出现箭头型透明溶血区
CAMP试验
B群链球菌产生一种CAMP因子//，能促进葡萄球菌的β溶素的溶血活性，在B群链球菌和葡萄糖球菌生长线交界处溶血力增加，出现箭头型透明溶血区
克氏双糖铁或三糖铁琼脂培养基试验
双糖铁培养基是以酚红做指示剂，含有葡萄糖或乳糖，其中葡萄糖含量仅为乳糖1/10的固体培养基。
能发酵乳糖或同时发酵葡萄糖的细菌产酸量较大，使KIA的斜面和底层均呈黄色
只能发酵葡萄糖而不发酵乳糖的细菌产酸量较少，在最初培养的8~10小时也可使深层和斜面均呈黄色，//连续培养18~24小时后，斜面部分的酸由于挥发、氧化和被细菌降解氨基酸所产生的胺类中和，斜面部分又恢复红色。/底部由于处于缺氧状态，细菌分解氨基酸产生的酸。一时不被氧化，依然呈黄色。
如果发酵糖类产生气体可在培养基中出现气泡，或气体冲破琼脂的裂隙//有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸产生的H2S在酸性条件下遇铅或铁离子形成硫化氢或硫化亚铁，在底层形成黑色的沉淀物。
动力-靛基质-尿素酶实验MIU
MIU培养基是以酚红为指示剂的含色氨酸和尿素的半固体培养基。产生色氨酸酶的细菌降解色氨酸形成吲哚，加入吲哚试剂后，培养基上层变红。/产生尿素酶的细菌能分解尿素产氨，使整个培养基变碱呈红色。有动力的细菌除沿穿刺线生长外，在穿刺线两侧也可见羽毛状或云雾状浑浊生长

细胞病变   病毒在敏感细胞内增殖时可引起特有的细胞改变称为细胞病变  CPe

抗菌药物敏感试验
①可预测抗菌治疗的效果
②发现或提示细菌耐药机制的存在
③监测细菌耐药性，分析耐药菌的变迁，掌握耐药菌感染的流行病学。
④指导抗菌药物的临床应用

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